納米銀治療脊柱結(jié)核的初步實驗研究.pdf

1、第一部分納米銀溶液對結(jié)核分枝桿菌的體外抗菌實驗 目的：研究在培養(yǎng)基內(nèi)納米銀溶液對結(jié)核分枝桿菌的抗菌作用，以及其抗菌作用是否與細菌的耐藥性相關。 材料和方法：分別采用美國BD公司的960分枝桿菌分析系統(tǒng)和改良羅氏培養(yǎng)基進行藥敏實驗，評價納米銀溶液對結(jié)核桿菌的作用。測定其最小抑菌濃度，抑菌效果與時間的關系。 結(jié)果：1.在960分枝桿菌分析系統(tǒng)內(nèi)進行的實驗證明：當納米銀的濃度達到1μg/ml時，開始對結(jié)核分枝桿菌有抑制

2、作用；當濃度達到5μg/ml時，能完全抑制結(jié)核分枝桿菌的生長；并且，納米銀溶液對結(jié)核分枝桿菌的抑制作用與結(jié)核分枝桿菌對鏈霉素、異煙肼、利福平、乙胺丁醇的耐藥性無關。2.在改良羅氏培養(yǎng)基內(nèi)進行的實驗證明：當納米銀的濃度達到10μg/ml時，開始對結(jié)核分枝桿菌有抑制作用，當濃度達到20μg/ml時能完全抑制結(jié)核分枝桿菌的生長。100μg/ml濃度的納米銀溶液與結(jié)核分枝桿菌作用9小時可抑制40％的結(jié)核分枝桿菌生長；1μg/ml的納米銀溶液在與

3、結(jié)核分枝桿菌作用24小時可完全抑制結(jié)核分枝桿菌的生長。 結(jié)論：納米銀溶液對結(jié)核分支桿菌有較強的抗菌作用，并且其抗菌作用與細菌對鏈霉素、異煙肼、利福平、乙胺丁醇的耐藥性無關。作用相同時間，納米銀濃度越高，抑菌率就越高；同一濃度下，作用時間越長，抑菌率就越高。 第二部分兔椎間盤內(nèi)納米銀溶液對結(jié)核分支桿菌的抗菌實驗 目的：研究兔椎間盤結(jié)核感染模型的建立以及在椎間盤內(nèi)環(huán)境下納米銀溶液對結(jié)核分支桿菌的抗菌作用。 材

4、料和方法：取新西蘭大白兔12只，10只經(jīng)脊柱前外側(cè)腹膜外入路，切除14/15椎間盤前半部分，并刮除部分軟骨終板。用皮試針注射器將0.2ml預制好的結(jié)核桿菌細菌懸濁液注射在體積約為1cm3大小的明膠海綿中，將明膠海綿塞入椎間隙。再用皮試針注射器將0.1ml納米銀溶液(200μg/ml)注射入椎間隙內(nèi)，最后用骨臘封閉以防止細菌懸濁液泄露到椎間隙以外。用同樣的方法從另一側(cè)將細菌懸濁液接種到L6/L7椎間隙，但不注射納米銀溶液。另將剩余2只新西

5、蘭大白兔僅注射生理鹽水，為空白對照。分別于接種后的1、2、4、6周拍攝脊柱正側(cè)位X線片。最后將動物處死，取接種椎間隙組織進行病理學分析和細菌培養(yǎng)。 結(jié)果：2只試驗兔在觀察過程中死亡。術后6周，在接種了結(jié)核桿菌的剩余8只試驗兔中，有6只的X線片在L6/L7節(jié)段觀察到明顯的終板破壞，病理學切片檢查確認病變部位為干酪樣壞死，且有4只病變組織的結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)為陽性。所有試驗兔的L4/L5節(jié)段椎間隙X線片沒有看到異常改變，病檢未見有炎性