S-腺苷蛋氨酸對大鼠肝臟缺血再灌注損傷線粒體的保護作用.pdf

1、目的：在肝移植手術的過程中，供肝不可避免地要經(jīng)歷缺血再灌注過程。肝臟對缺血耐受力較低，肝臟缺血再灌注后，由于脂質過氧化反應增強、氧自由基的大量形成等損傷線粒體而最終導致肝細胞不同程度的損傷和代謝紊亂。S-腺苷蛋氨酸(SAM)是存在于人體所有組織和體液中的一種生理活性分子，它作為甲基供體和生理性巰基化合物的前體，參與體內(nèi)重要的生化反應，對于肝細胞再生、分化以及調節(jié)肝細胞對于各種損傷的敏感程度均起非常重要的作用。然而，國內(nèi)文獻多報道SAM在

2、防止膽汁淤積方面的作用，而在它對于肝細胞缺血再灌注損傷是否也存在保護作用方面研究尚少。因此，本實驗擬利用大鼠肝臟缺血再灌注模型，以肝細胞的微觀結構線粒體作為研究對象，對比觀察實驗動物同一時間點的臨床生化改變、線粒體酶學變化、能量代謝的變化以及超微結構的改變等方面的變化規(guī)律，從而探索SAM預處理對肝臟缺血再灌注損傷的保護作用及其部分機制，為指導今后的實驗研究及其臨床應用提供科學依據(jù)。 方法：健康雄性清潔級SD大鼠54只，隨機分為3

3、個組，每組18只，即為對照組、缺血再灌注組(I/R組)和S-腺苷蛋氨酸預處理組(SAM組)。每組按缺血后再灌注不同時間點分別再分為0、1、6小時組。在上述三個時間點抽取下腔靜脈血并切取肝組織制備線粒體，檢測血清ALT、AST和線粒體GSH、GLDH、SOD、MDA、ATP、ADP、AMP的含量或活力以及用電鏡觀察線粒體超微結構的變化。實驗結果按同一時間點I/R組與對照組比較，SAM組與I/R組比較。 結果：I/R組血清中的ALT

4、、AST和線粒體GLDH、MDA均顯著高于對照組，線粒體GSH、SOD、ATP等水平顯著低于對照組；而SAM組血清中的ALT、AST和線粒體GLDH、MDA與I/R組對比均有明顯的降低，線粒體GSH、SOD、ATP等水平與I/R組對比均有明顯的升高，這種差異有顯著的統(tǒng)計學意義。電鏡觀察，對照組肝細胞線粒體結構改變不明顯，大多無腫脹，線粒體膜完整。I/R組可見線粒體數(shù)量減少，腫脹明顯，嵴模糊不清，基質密度低，線粒體膜部分或完全崩解。部分肝

5、細胞核固縮，在肝細胞之間還可見到凋亡小體。SAM組與相同時間點I/R組對比，肝細胞超微結構改變較輕，大部分線粒體輕度腫脹，呈圓形，儀有少數(shù)線粒體膜不完整，未見到肝細胞核固縮和溶解現(xiàn)象。 結論：SAM能增強超氧化物歧化酶的活力，清除氧自由基，抑制脂質過氧化反應。SAM能抑制次黃嘌呤核苷向次黃嘌呤轉變從而提高肝臟腺苷的濃度，有利于細胞內(nèi)ATP的產(chǎn)生，最終提高線粒體的能量代謝水平。SAM能增加線粒體GSH池的含量并消弱氧化應激反應，從