補腎健脾固沖方對子宮內膜增生大鼠模型VEGF,BAX,BCL-2作用的實驗研究.pdf

1、目的：本課題以中醫(yī)理論為基礎，結合現代醫(yī)學實驗研究，建立子宮內膜增生大鼠模型，用補腎健脾固沖中藥進行干預，通過觀察補腎健脾固沖方對子宮內膜增生大鼠子宮局部活性物質 VEGF,BAX,BCL-2含量的影響，分析補腎健脾中藥對子宮局部微環(huán)境的影響，進而探討補腎健脾中藥治療青春期功血的作用機理，為臨床治療青春期功血提供更為開闊的治療思路。
　　方法：本實驗選用 SD幼年雌性大鼠為研究對象，卵巢去勢后雌激素刺激建立子宮內膜增生模型，以戊酸

2、雌二醇、中藥補腎健脾固沖方、醋酸甲羥孕酮片和宮血停顆粒為實驗用藥。將90只未成年雌性大鼠于30日齡,體重90±10g行卵巢摘除手術，其中15只大鼠為假手術組僅行開關腹術，術后注射青霉素三天預防感染，連續(xù)五天涂大鼠陰道脫落細胞，無角化細胞即手術成功。手術成功的大鼠隔天灌服戊酸雌二醇共45天，病理提示大鼠子宮內膜增生即為造模成功。將造模成功的大鼠隨機分為5組，即模型組、西藥組、宮血停組、補腎健脾固沖方高、低劑量組，每組15只。
　　在

3、同種飼養(yǎng)條件下，對造模成功的大鼠灌服實驗用藥，假手術組和模型組給予等體積去離子水灌服，宮血停組灌以宮血停混懸液12g/kg（濃度約0.6g/ml）、西藥組灌以醋酸甲氫孕酮混懸液2mg/kg（濃度約0.1mg/ml）、中藥高、低劑量組分別灌以補腎健脾固沖方煎劑，高劑量15 g/kg（生藥濃度約1.5g/ml）、低劑量7.5 g/kg（生藥濃度約0.75g/ml），分別相當于臨床劑量的6.7倍、3.35倍，連續(xù)灌藥30天后處死，檢測相關指標

4、。大鼠左側子宮用多聚甲醛固定，再脫水包埋,用 HE染色法染色,免疫組化法檢測子宮局部 VEGF和BAX,BCL-2的表達。全部數據的統(tǒng)計分析均在 SPSS18.0軟件的支持下實現。
　　結果：（1）實驗各組大鼠子宮內膜增生情況改善，局部細胞層次減少。（2）補腎健脾固沖方能使子宮內膜 VEGF表達明顯升高（P<0.05）；（3）補腎健脾固沖方能使子宮內膜 BAX表達明顯升高（P<0.05），BCL-2表達明顯降低（P<0.05），B

5、AX/BCL-2比值顯著升高(P<0.05，且 P＜0.01)。
　　結論：本實驗證明了中藥補腎健脾固沖方能提高子宮局部 VEGF的表達，從而達到修復內膜血管，止血的目的；通過上調 BAX/BCL-2的比值，促使異常增生的子宮內膜細胞凋亡，達到改變子宮內膜過度增生的病理狀態(tài)。提示補腎健脾固沖方具有調節(jié)子宮局部活性因子的作用，為本方可改善局部微環(huán)境的作用機理提供了實驗依據，也為臨床運用補腎健脾固沖法治療青春期無排卵性功血提供了理論支