CO-,2-氣腹下子宮惡性腫瘤腹腔鏡手術影響腫瘤細胞種植和轉移的研究.pdf

1、第一章腹腔鏡手術治療子宮惡性腫瘤的安全性問題 目的：穿刺部位轉移(PSM)的出現(xiàn)是惡性腫瘤的微創(chuàng)手術中最嚴重的并發(fā)癥，是可能限制腹腔鏡手術在惡性腫瘤治療中應用的焦點問題。 方法：利用國內外文獻庫，搜索子宮頸癌和子宮內膜癌腹腔鏡術后報道的PSM現(xiàn)象和相關機制；搜索有關子宮頸癌和子宮內膜癌腹腔鏡手術并發(fā)癥和預后的臨床研究。 結果：共報道了15例宮頸癌和7例子宮內膜癌的PSM現(xiàn)象。PSM發(fā)生的主要病因學有：①腫瘤細胞直

2、接污染手術中穿刺套管部位；②煙霧化作用和煙囪效應；③免疫反應：④手術技巧；⑤CO<,2>氣腹。其中CO<,2>氣腹的作用最引人注目，CO<,2>氣腹主要作用機理有：①CO<,2>氣腹對腹膜造成的局部組織創(chuàng)傷；②CO<,2>氣腹形成的腹腔酸性環(huán)境影響惡性腫瘤細胞生物學行為；③CO<,2>氣腹對宿主局部免疫能力的抑制；@C02氣腹對轉移相關粘附分子的影響：⑤CO<,2>氣腹對腫瘤細胞生長的作用等等。 結論：PSM在子宮惡性腫瘤的腹腔

3、鏡手術中發(fā)生率低。大量資料顯示己完成的腹腔鏡手術的并發(fā)癥發(fā)生率和術后腫瘤復發(fā)率與傳統(tǒng)開腹手術相比無區(qū)別。但子宮惡性腫瘤的腹腔鏡手術的安全性問題要經循證醫(yī)學論證，將需要大樣本的前瞻性隨機臨床研究的證據(jù)。 第二章CO<,2>氣腹下宮頸癌腹腔鏡手術對癌細胞種植和轉移能力的影響 目的：通過觀察CO<,2>氣腹下宮頸癌的腹腔鏡手術是否對反映癌組織種植和轉移能力的指標E一鈣粘素(E-cadherin)、β-連環(huán)素(β-catenin

4、)、P-選擇素(P-selectin)、基質金屬蛋白酶一2(MMP．2)、血管內皮生長因子(VEGF)和血管內皮生長因子-C(VEGFF-C)的表達有影響，來尋找宮頸癌腹腔鏡手術可能影響腫瘤種植和轉移的臨床基礎依據(jù)。 方法：選擇2005年9月～2006年9月在佛山市第一人民醫(yī)院婦科，F(xiàn)IGO臨床分期Ⅰ a-Ⅱa，行腹腔鏡手術的宮頸癌病例20例和同期行開腹手術的病例10例。 腹腔鏡手術采用15-1711全自動氣腹機(德國

5、Ackerman Instrumente)形成C02氣腹，每充氣流量設定4至6L/min，腹腔內CO<,2>氣腹壓力均維持在13mmHg。 收集20例腹腔鏡手術剛開始和結束前的腹腔沖洗液、手術過程中CO<,2>氣體濾過液和器械沖洗液行腫瘤細胞學檢查。DAKO Envision二步法檢測患者手術開始時和手術結束前的宮頸癌組織的E-cadherin、β-catenin、P-selectin、MMP-2、VEGF蛋白表達；熒光定量RT

6、-PCR方法檢測宮頸癌組織的E-cadherin、MMP-2和VEGFF-CmRNA表達。 結果：腹腔鏡組手術中消耗的CO<,2>氣體平均總量(546．00±197．0)L。20例宮頸癌患者腹腔鏡手術開始時和結束前的腹腔沖洗液、CO<,2>氣體濾過液和器械沖洗液的腫瘤細胞學檢查均未找到癌細胞。 腹腔鏡組宮頸癌組織的E-cadherin、β-catenin蛋白的異常表達在手術后有輕微提高，但腹腔鏡組和開腹組的手術前后癌組織

7、這兩種蛋白的異常表達無差異(P>0．05)；在腹腔鏡組和開腹組之間比較手術前后E-cadherin、β-catenin蛋白的異常表達變化情況無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。 分別比較腹腔鏡組手術前后和開腹手術前后宮頸癌組織中MMP-2、P-selectin和VEGF這三種蛋白的陽性表達和強陽性表達均無顯著性差異(P>0．05)。MMP-2、P-selectin蛋白在腹腔鏡組術后的增加趨勢似較開腹手術稍明顯；但在腹腔鏡組和開腹組兩種

8、不同手術方式之間，比較手術前后MMP-2、P-selectin的陽性表達和表達強度的差別無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。 腹腔鏡組和開腹組手術后E-cadherin mRNA表達均有降低趨勢，MMP-2和vEGF-C mRNA表達有增加趨勢；但腹腔鏡組和開腹組手術前后E-cadherin、MMP-2和VEGP-C mRNA表達無明顯差異(P>0．05)。在腹腔鏡組和開腹組之間比較手術前后E-cadherin、MMP-2和VEGF-

9、C的mRNA含量的變化情況均無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。 結論：20例CO<,2>氣腹下的宮頸癌腹腔鏡手術沒有促進在宮頸癌種植和轉移過程中起重要作用的一些因子表達。在本項研究范圍內沒有找到CO<,2>氣腹下宮頸癌腹腔鏡手術促進早期宮頸癌轉移的依據(jù)。 第三章CO<,2>氣腹下子宮內膜癌腹腔鏡手術對癌細胞種植和轉移能力的影響.目的：擬結合臨床病例特點，觀察CO<,2>氣腹腹腔鏡手術前后與內膜癌坌山胞侵潤和轉移潛能緊密相關的

10、指標E-cadherin、β-catenin、P-selectin、MMP-2、VEGF和VEGF-C的變化情況，研究C02氣腹下子宮內膜癌腹腔鏡手術是否對癌細胞種植和轉移能力有影響，為腹腔鏡手術在子宮內膜癌的應用尋找臨床基礎理論依據(jù)。 方法：選擇2005年9月～2006年9月在佛山市第一人民醫(yī)院婦科，術前臨床分期Ⅰ期，行腹腔鏡下手術的子宮內膜癌病例20例和同期行開腹手術的病例10例。 腹腔鏡手術采用15-1711全自動

11、氣腹機(德國 Ackerman Instrumente)形成C02氣腹，每充氣流量設定4至6L/min，腹腔內CO<,2>氣腹壓力均維持在13minHg。 收集20例腹腔鏡手術剛開始和結束前的腹腔沖洗液、手術過程中CO<,2>氣體濾過液和器械沖洗液行腫瘤細胞學檢查。DAKO Envision二步法檢測患者手術開始時和手術結束前內膜癌組織的E-cadherin、β-catenin、P-selectin、MMP-2、VEGF蛋白的表

12、達。熒光定量RT-PCR方法檢測內膜癌組織的E.cadherin、MMP.2和VEGF-CmRNA表達。 結果：腹腔鏡組包括18例FIGO手術病理分期Ⅰ期和2例Ⅲc期，手術中消耗的C02氣體平均總量(291.22+162.17)L；手術剛開始和結束前的腹腔沖洗液、CO<,2>氣體濾過液和器械沖洗液的腫瘤細胞學檢查均未找到癌細胞，其中包括15例(75％)術前經宮腔鏡診刮確診。 E-cadherin、β-catenin蛋白在

13、內膜癌中表達呈明顯異常，腹腔鏡組手術前后E.cadherin和fj.catenin異常表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，在腹腔鏡組和開腹組之間分別比較手術前后E-cadherin和β-catenin的異常表達變化情況無顯著性差異(P>0.05)。 腹腔鏡手術前后和開腹手術前后，P-selectin、MMP-2和VEGF蛋白的表達情況均無明顯差異(P>0.05)，且在兩種手術方式中比較手術前后蛋白表達的變化情況無統(tǒng)計學差異(P>0

14、.05)。 E-cadherin、MMP-2和VEGF-C的mRNA表達量在腹腔鏡手術和開腹手術前后比較無明顯差異，且在兩種手術方式中比較手術前后這三種mRNA表達量的變化情況無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 結論：本研究證實早期子宮內膜癌的腹腔鏡手術中發(fā)生直接種植轉移的可能性較小，腹腔鏡手術沒有促進與子宮內膜癌侵潤和轉移潛能密切相關因子的表達。通過本研究沒有找到CO<,2>氣腹下子宮內膜癌腹腔鏡手術促進癌細胞種植和轉移的

15、依據(jù)。 第四章CO<,2>氣腹下子宮惡性腫瘤腹腔鏡手術中腹膜微環(huán)境的改變和意義. 目的：腹膜微環(huán)境改變是腹腔鏡手術中最有特征性改變之一。研究子宮惡性腫瘤腹腔鏡于術中腹膜間皮細胞生物學行為的改變，了解腹膜微環(huán)境變化對腫瘤細胞種植和轉移的可能影響。 方法：選擇2005年9月至2006年9月行腹腔鏡手術的宮頸癌和內膜癌各20例，與同期行開腹手術的宮頸癌和內膜癌各10例進行對比。 DAKO Envision二步法

16、檢測患者手術開始時和手術結束前腹膜間皮細胞的細胞問粘附分子-1(ICAM-1)和整合素β1(β1-integrin)蛋白的表達。 放免法測定不同手術時間的腹膜(開始時，手術1h、2h、3h和結束前)透明質酸濃度和術后不同時間的血透明質酸濃度(術后第1天、第3天和第5天)。 DAKO Envision二步法和熒光定量RT-PCR方法分別測定手術前后腫瘤組織的CD44v6蛋白表達和mRNA含量。 結果：隨腹腔鏡和開腹