晚期糖基化終末產物激活局部腎素血管緊張素系統(tǒng)導致糖尿病大鼠冠狀動脈結構和功能改變.pdf

1、目的:糖尿病的患病率及死亡率逐年提高,其心血管系統(tǒng)并發(fā)癥嚴重地威脅著人類健康,逐漸成為心血管領域研究的熱點之一。晚期糖基化終末產物的濃度與糖尿病血管病變的程度相關,局部腎素血管緊張素系統(tǒng)在糖尿病血管病變進程中起到重要的作用,已有研究證實二者之間存在著緊密的聯(lián)系。但是在糖尿病并發(fā)冠狀動脈病變中,晚期糖基化終末產物及其受體的水平、局部腎素血管緊張素系統(tǒng)的狀態(tài)、以及二者同冠狀動脈血管結構和功能改變的關系,尚缺乏深入系統(tǒng)的研究。本研究將通過驗證

2、“晚期糖基化終末產物激活局部腎素血管緊張素系統(tǒng)導致冠狀動脈結構和功能改變,給予氨基胍或纈沙坦阻斷此通路可以對冠狀動脈起到保護作用”的工作假說,為防治糖尿病并發(fā)冠心病提供新的理論基礎及臨床應用前景。
　　方法:建立STZ誘導的DM大鼠模型,并給予氨基胍及纈沙坦作為干預因素,利用免疫組化及ELISA方法對冠狀動脈AGEs進行定位、定量檢測,利用PCR及Western blot方法檢測冠狀動脈中RAGE的基因及蛋白表達水平,利用ELIS

3、A、PCR及Western blot方法檢測冠狀動脈中ANGⅡ-AT1的表達水平,利用離體動脈環(huán)技術和電子顯微鏡技術觀察冠狀動脈血管舒縮功能及超微形態(tài)結構的改變,利用Western blot技術測定冠狀動脈組織中eNOS、ET-1及NF-κB的表達水平。
　　結果:1、DM大鼠冠狀動脈AGEs含量增多,多存在于冠狀動脈內皮組織,冠狀動脈組織中的RAGE的mRNA及蛋白表達水平上調,冠狀動脈血管環(huán)的收縮及舒張反應性降低,對KCl的敏

4、感性增加,對ACh的敏感性降低,冠狀動脈內皮組織的超微結構出現(xiàn)病理性改變,冠狀動脈中活性NF-κB、ET-1蛋白表達增加,eNOS蛋白表達減少;2、給予氨基胍干預DM大鼠,可以減少冠狀動脈中AGEs的生成,降低RAGE的mRNA及蛋白表達水平,提高冠狀動脈血管環(huán)的收縮及舒張反應性,降低對KCl的敏感性,提高對ACh的敏感性,改善冠狀動脈內皮組織的超微結構,減少冠狀動脈中活性NF-κB、ET-1蛋白的表達,增加eNOS蛋白的表達;3、AG

5、Es使DM大鼠循環(huán)血液及冠狀動脈組織中ANGⅡ的濃度增高,冠狀動脈組織中AT1 mRNA及蛋白表達水平增高,給予氨基胍干預可以使DM大鼠冠狀動脈ANGⅡ-AT1水平下降;4、給予纈沙坦干預不能影響DM大鼠冠狀動脈AGEs-RAGE水平,可以降低DM大鼠冠狀動脈ANGⅡ-AT1水平,提高冠狀動脈血管環(huán)收縮及舒張反應性,改善冠狀動脈內皮組織的超微結構,增加冠狀動脈組織中eNOS蛋白表達,減少冠狀動脈組織中ET-1、NF-κB蛋白表達。