人胃癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株SGC7901-TAX的建立.pdf

1、目的： 體外建立人胃癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株，觀察其生物學(xué)特性，檢測(cè)其細(xì)胞內(nèi)mdr1的表達(dá)，初步探討多藥耐藥機(jī)制的發(fā)生。 方法： 以紫杉醇為誘導(dǎo)藥物，在體外采用濃度梯度倍增法誘導(dǎo)培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞株SGC7901約7個(gè)月，最終建立胃癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株SGC7901/TAX。以HE染色法，光鏡下觀察兩株細(xì)胞的形態(tài)；體外藥物敏感實(shí)驗(yàn)比較兩株細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性；運(yùn)用RT-PCR方法檢測(cè)兩株細(xì)胞內(nèi)mdrl基因的表達(dá)情況。

2、 結(jié)果： 胃癌細(xì)胞SGC7901經(jīng)TAX誘導(dǎo)7個(gè)月后，獲得胃癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株SGC7901/TAX，與SGC7901相比，耐藥細(xì)胞株大小不一，部分細(xì)胞呈梭形，出現(xiàn)巨細(xì)胞；體外藥物敏感實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示SGC7901/TAX細(xì)胞株對(duì)TAX、5-Fu、CDDP均有一定的耐藥性，半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為：(1)、TAX：a、SGC7901，：27.09±0.12 μg/L，b、SGC7901/TAX：135.50±0.51 ug/

3、L，兩者間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)；(2)、5-Fu：a、SGC7901:106.87±0.48 μ g/L，b、SGC7901/TAX：319.40±0.98μ g/L，兩者間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)；(3)、CDDP：a、SGC7901:317.85±1.33μg/L，b、SGC7901/TAX：519.45±5.73 μg/L，兩者間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。3種藥物的耐藥指數(shù)分別為5.00、2.99

4、和1.63。RT-PCR檢測(cè)結(jié)果：mdrlmRNA在SGC7901細(xì)胞內(nèi)的相對(duì)表達(dá)量為0.3065±0.0374，在SGC7901/TAX細(xì)胞內(nèi)的相對(duì)表達(dá)量為0.8954±0.0323，兩者間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。 結(jié)論： 1、體外濃度梯度倍增法可誘導(dǎo)建立人胃癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株SGC7901/TAX； 2、胃癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株SGC7901/TAX耐藥的發(fā)生與mdrl基因表達(dá)有關(guān)系； 3、胃