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文檔簡介
1、目的:
研究耐藥性對人肺腺癌耐順鉑株A549/DDP的放射敏感性的影響,探討導(dǎo)致耐藥肺癌細(xì)胞株放化療交叉耐受性可能的機(jī)制。
方法:
以人肺腺癌細(xì)胞株A549及人肺腺癌耐藥株A549/DDP為研究對象,觀察不同的放射劑量照射前后細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的變化。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)的變化,用四氮哇藍(lán)(MTT)法測定放射線照射后細(xì)胞增殖抑制的時間-劑量關(guān)系,由此觀察A549及耐藥株A
2、549/DDP的放射敏感性。在熒光顯微鏡下用Hoechest33342/PI雙染色法觀察大劑量放射線照射前后的細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞凋亡,用流式細(xì)胞術(shù)測定大劑量放射線照射前后的細(xì)胞周期,觀察對順鉑耐藥株的放化療相互作用結(jié)果,及可能出現(xiàn)的機(jī)制。
結(jié)果:
1、小劑量(2Gy和4Gy)照射48小時后,放射線對兩種細(xì)胞株的增殖抑制作用出現(xiàn)差異。大劑量(6Gy和8Gy)照射24小時后,放射線對兩種細(xì)胞的增殖抑制作用出現(xiàn)差異性。
3、更大劑量(10Gy)照射后兩種細(xì)胞的增殖抑制均較強(qiáng),差異性不明顯。放射線對兩種細(xì)胞株的增殖均有抑制作用,有時間和劑量依賴性。2、放射前后兩種細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化,放療后的細(xì)胞存在凋亡小體。A549/DDP細(xì)胞凋亡率明顯低于A549細(xì)胞株,6Gy照射48小時A549細(xì)胞的凋亡率為38.84%,A549/DDP細(xì)胞的凋亡率為15.5%。3、6Gy照射后48小時A549細(xì)胞的S期從15.81±0.83%到19.31±1.16%,A549/D
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