腫瘤反應性對TGF-β不敏感的CTL細胞對異種移植裸鼠前列腺癌治療作用的研究.pdf

1、目的：利用裸小鼠建立人前列腺癌腫瘤動物模型，再利用腫瘤反應性TGF-β不敏感的CTL進行治療試驗；收獲裸鼠移植瘤塊，利用其滿足相關實驗研究需要，如TGF-β水平測定、腫瘤相關抗原的提取等；將裸鼠體內過繼培養(yǎng)所得瘤塊進行原代培養(yǎng)并與直接組織塊培養(yǎng)方法進行對比，探索更好的細胞原代培養(yǎng)方法。 方法：將自前列腺癌根治手術中獲得的前列腺癌組織標本，接種于4周齡、雄性的裸小鼠右腋側皮下，待瘤塊生長至合適大小后取下瘤塊，部分凍存，其余按相同的

2、方法進行傳代，如此一共3次，獲得前列腺癌腫瘤動物模型。將大部分荷瘤裸鼠模型隨機分成2組，通過鼠尾靜脈注射本實驗室提供的CTL進行前列腺癌免疫治療的體內實驗，觀察并記錄數據，最后利用SPSS統(tǒng)計軟件分析治療結果；收獲裸鼠瘤塊，凍存一部分用ELISA方法測定TGF-β水平、提取腫瘤相關抗原并刺激腫瘤反應性CTL增殖；其余新鮮組織用組織塊培養(yǎng)法進行前列腺癌細胞原代培養(yǎng)，觀察細胞生長狀態(tài)。 結果： 1.獲得前列腺癌腫瘤動物模型1

3、4只，利用12只(治療中死亡1只)隨機分為兩組進行治療實驗，治療前兩組平均體積對比經SPSS13.0軟件進行t檢驗，P>0.05，差別無統(tǒng)計學意義，治療后體積對比p<0.01，差別具有統(tǒng)計學意義； 2.將剩余2只裸鼠瘤塊大部分收集凍存，與之前凍存的瘤塊一起用于提取腫瘤相關抗原并刺激CTL增殖。加入腫瘤抗原與不加腫瘤抗原相比，CTL數量擴增明顯；同一患者血清FGF-β水平為4.873ng/ml，裸鼠種植與手術所獲瘤塊TGF-β水平

4、為12.116ng/ml、8.368ng/ml，前者大于后者。 3.裸鼠過繼培養(yǎng)來源的組織塊進行原代細胞培養(yǎng)，雖然沒有建立穩(wěn)定傳代的細胞系，但與直接組織塊培養(yǎng)法結果對比，細胞成分更為單一，生長和增殖能力增強。 結論： 1.利用TGF-β不敏感腫瘤反應性的CTL細胞進行前列腺癌免疫治療研究具有重要的臨床應用價值，利用裸鼠建立前列腺癌荷瘤模型，并以此作為載體進行體內治療實驗研究是簡捷、經濟、有效的研究方法。