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文檔簡介
1、靈芝(Ganoderma lucidum)為多孔菌科的擔子菌,在中國已有2000多年的民間藥用史,主要用于治療肝炎、慢性氣管炎、哮喘、心絞痛、高血壓、神經衰弱和腫瘤等疾病。近年來,關于靈芝提取物的研究已在全世界范圍展開,多糖作為靈芝中主要的有效成分之一,受到了越來越多的關注。研究證明,靈芝多糖具有增強免疫功能、抑制腫瘤、降血糖、延緩衰老等作用。由于目前對靈芝均一多糖組分的詳細化學結構報道較少,為系統(tǒng)地研究靈芝多糖的化學結構和生物活性,本
2、文對靈芝子實體多糖組分進行了分離純化、結構解析及免疫活性研究。 本論文共有三個部分,分別從多糖的脫色工藝、分離純化和理化性質、結構分析和免疫活性等方面進行了研究。主要結果如下: 1靈芝子實體多糖的分離純化及理化性質研究119#靈芝子實體經醇脫脂,熱水浸提后超濾分級得到四個組分GLPA、GLPB、GLPC和GLPD。 通過單因素試驗和正交試驗,篩選出適宜GLPA脫色的工作條件為:AB-8樹脂、pn=4.0、T=60
3、℃,在此條件下多糖脫色率可達87.38%,多糖保留率為89.24%,蛋白質去除率為77.11%。 利用陰離子柱交換層析(DEAE-SepharoseFF)和凝膠柱層析(SephacrylS300)對GLPB進行了分離純化,得到兩個均一多糖,用高效液相色譜法、苯酚-硫酸法和BCA法對其分子量、總糖含量和蛋白含量進行鑒定,結果如下: GLPBW1-1和GLPBS1-1-a為白色絮狀樣品,且均易溶于水、二甲基亞砜,難溶于乙醇、
4、甲醇、丙酮等有機溶劑。 2靈芝子實體多糖結構的初步研究通過紅外光譜分析、單糖組成分析、甲基化分析和核磁共振(一維:1HNMR譜、13CNMR譜;二維:1H-1HCOSY譜、TOCSY譜、NOESY譜、HMQC譜和HMBC譜)技術,研究了GLPBS1-1-a的化學結構。 單糖組成分析結果表明GLPBS1-1-a含有巖藻糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖,以1:4.5:1.6:0.9組成。甲基化分析結果表明,巖藻糖以端基方式連接,半
5、乳糖主要以1,6-和1,2,6-兩種方式連接,還有一些其它的連接型式單糖殘基存在,三個主要殘基的摩爾比約為1:4:1。由NMR進一步分析結果表明GLPBS1-1-a存在以下結構重復單元: 3靈芝子實體多糖的體外免疫活性研究GLPA及脫色后的GLPAT對小鼠脾淋巴細胞均無明顯刺激增殖作用;GLPB經陰離子柱交換層析分離后,所得各組份GLPBW、GLPBS1和GLPBS2均有較高的刺激小鼠脾淋巴細胞增殖作用,水相組分GLPBW增殖作
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