犬牙周膜牽張快速移動牙壓力側牙周組織中RANKL和OPG表達的研究.pdf

1、目的:
　　 通過建立Beagle犬牙槽隔減阻牙周膜牽張(periodontal ligamentdistraction,PDLD)快速移動牙齒的實驗動物模型,觀察壓力側牙周組織中RANKL和OPG的表達變化,并比較其與常規(guī)正畸牙齒移動過程中RANKL和OPG表達的區(qū)別,探討RANKL和OPG在PDLD快速移動牙齒牙周組織改建過程中所起的作用,為研究PDLD快速移動牙齒過程中壓力側牙周組織改建的機制和臨床運用提供理論依據(jù)。

2、>　　 方法:
　　 8只純種Beagle犬隨機分為A組(加力1周)、B組(加力2周)、C組(加力2周,保持2周)和D組(加力2周,保持4周),每組二只,拔除8只Beagle犬下頜兩側第二前磨牙,采用自身對照設計,每只犬下頜的左右側隨機分為PDLD側和常規(guī)方法正畸牙齒移動對照側。以下頜第三前磨牙為支抗牙,下頜第一前磨牙為移動牙。上頜第一前磨牙為正常對照。PDLD側移動牙遠中牙槽間隔行減阻術,粘結牽張器,以2次/天的頻率、每次將

3、牽張器中螺旋擴大器的螺旋旋轉90°,加力2周后固定保持。常規(guī)對照側用NiTi螺旋彈簧牽引移動牙向遠中,力約1.47牛頓,加力2周后固定保持。測量移動牙移動距離。實驗動物在預先規(guī)定的時間取材,固定,脫鈣,石蠟包埋,切片,HE染色觀察移動牙壓力側牙周組織的形態(tài)學變化;TRAP染色觀察壓力側牙周組織中破骨細胞數(shù)目的變化;免疫組化染色觀察移動牙壓力側牙周組織中RANKL、OPG的變化,應用圖像分析系統(tǒng)對RANKL、OPG含量進行半定量分析。并采

4、用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對實驗結果進行統(tǒng)計學分析。
　　 結果:
　　 1牙齒移動距離.力口力1周時,常規(guī)對照側牙齒向遠中移動0.47±0.21mm,PDLD側為1.47±0.55mm,兩側牙齒移動距離存在統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。加力2周時,常規(guī)對照側遠中移動0.68±0.59mm,PDLD側為3.98±1.26mm,兩側牙齒總的移動距離存在統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。
　　 2 HE染色結果:加力后,常規(guī)

5、對照側移動牙壓力側牙周膜明顯縮窄,可見明顯無細胞結構的玻璃樣變組織及潛掘性骨吸收,隨著時間的延長玻璃樣變組織逐漸被清除,牙槽間隔骨表面出現(xiàn)明顯破骨細胞及骨吸收陷窩。PDLD側牙周膜較常規(guī)對照側受壓縮窄程度輕,未見玻璃樣變組織,隨著加力時間的延長,遠中固有牙槽骨彎曲或折斷并進入拔牙窩,間隔骨周圍及內部有大量破骨細胞,間隔骨吸收變薄,部分牙周膜與拔牙窩相通。加力2周,保持4周時,PDLD和常規(guī)方法移動牙壓力側牙周膜寬度基本恢復。3壓力側牙周

6、組織中破骨細胞TRAP染色結果:PDLD側和常規(guī)對照側移動牙壓力側牙周組織中TRAP染色陽性破骨細胞在受力后均增加。PDLD側在加力2周時,TRAP染色陽性破骨細胞個數(shù)達峰值。常規(guī)對照側在加力2周,保持2周時達峰值。PDLD側和常規(guī)對照側的破骨細胞個數(shù),在A組(P＜0.01)、B組(P＜0.01)和C組(P＜0.01)中均存在統(tǒng)計學差異。4壓力側牙周組織中RANKL、OPG的表達變化:RANKL、OPG陽性著色部位主要位于牙周膜成纖維細

7、胞、成骨細胞、血管內皮細胞、骨襯里細胞和骨陷窩內破骨細胞的胞漿。在常規(guī)對照側,加力后RANKL和OPG的表達均逐漸增強,在加力2周,保持2周時RANKL的表達及RANKL/OPG含量比值達峰值,之后逐漸下降,而OPG的表達保持較高水平。在PDLD側,加力后RANKL和OPG的表達均較強,在加力2周時RANKL的表達及RANKL/OPG含量比值達峰值,之后逐漸下降,而OPG的表達繼續(xù)升高。在PDLD側和常規(guī)對照側的A組(P＜0.01)、B

8、組(P＜0.01)和C組(P＜0.05)中RANKL的表達均存在統(tǒng)計學差異。在PDLD側和常規(guī)對照側的A組(P＜0.01)、B組(P＜0.01)、C組(P＜0.01)和D組(P＜0.01)中OPG的表達均存在統(tǒng)計學差異。在PDLD側和常規(guī)對照側的A組(P＜0.01)、B組(P＜0.01)、C組(P＜0.05)和D組(P＜0.01)中RANKL/OPG含量比值均存在統(tǒng)計學差異。
　　 結論:
　　 1牙槽隔減阻牙周膜牽張移

9、動牙齒可以明顯加快正畸牙齒移動速度。
　　 2在觀察時間內,牙槽隔減阻牙周膜牽張快速移動牙壓力側的破骨細胞數(shù)高于常規(guī)正畸牙齒移動,顯示其壓力側發(fā)生較早與較快的骨吸收。
　　 3 RANKL和OPG參與牙槽隔減阻牙周膜牽張與常規(guī)正畸移動牙壓力側牙周組織的改建。RANKL/OPG含量比值的變化調節(jié)壓力側牙周組織中破骨細胞的產生及其吸收功能。與常規(guī)正畸牙齒移動相比,在牙槽隔減阻牙周膜牽張移動牙齒過程中RANKL、OPG的表達和