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文檔簡介
1、人免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency Vires,HIV-1)自20世紀80年代發(fā)現(xiàn)以來,已在全球造成大約3340萬人感染艾滋病,其中去年新增感染者270萬人,200萬人死于與艾滋病相關(guān)的疾病。截至2009年10月底,我國累計報告艾滋病病毒感染者和病人319877例,其中艾滋病病人102323例;報告死亡49845例,艾滋病疫情呈上升趨勢,存在疫情進一步蔓延的危險。越來越多的研究表明HIV抗原特異性的CD8+
2、T細胞免疫應(yīng)答在清除病毒感染的細胞,降低血液中的病毒載量起著重要的作用,因此研究誘導(dǎo)T細胞免疫反應(yīng)的HIV-1疫苗具有很好的現(xiàn)實意義,可以達到延緩感染者發(fā)展為AIDS的進程、減少HIV傳播、控制艾滋病流行范圍等目的。
HIV-1 B亞型和B/C重組亞型病毒是在中國流行較廣的兩種病毒亞型,具有分布范圍廣,新增感染人數(shù)多的特點。我們擬通過將表達B亞型和B/C重組亞型HIV抗原的多種載體疫苗聯(lián)合應(yīng)用來誘導(dǎo)高水平并且持久的HIV特
3、異性細胞免疫反應(yīng)。
本研究中采用表達HIV-1 B/C重組亞型gag-env-pol基因的DNA和重組痘病毒疫苗(rMVA)及表達HIV-1B亞型gag基因的DNA疫苗和重組腺病毒疫苗(rAdV)在小鼠體內(nèi)聯(lián)合免疫,比較了兩種疫苗聯(lián)合免疫與三種疫苗聯(lián)合免疫所誘導(dǎo)的Gag特異性細胞免疫和體液免疫反應(yīng)的水平。實驗中采用ELISpot方法檢測細胞免疫反應(yīng),ELISA方法檢測血清中P24抗原特異性的IgG抗體的滴度。結(jié)果顯示,兩種
4、亞型的DNA疫苗與rMVA疫苗聯(lián)合免疫的細胞免疫反應(yīng)都明顯低于與rAdV疫苗聯(lián)合免疫組,后者是前者的2~8倍。rMVA與rAdV疫苗聯(lián)合免疫的細胞免疫反應(yīng)水平與免疫順序有關(guān),先免疫rMVA疫苗的方案優(yōu)于先免疫rAdV疫苗的方案。三種疫苗聯(lián)合免疫的方案DNA/rAdV/rMVA與DNA/rMVA/rAdV跟上述兩種疫苗聯(lián)合免疫的方案相比,細胞免疫反應(yīng)水平明顯增強,而且rMVA和rAdV疫苗加強免疫的先后順序?qū)γ庖咝Ч麤]有影響。在體液免疫方
5、面,各組均能誘導(dǎo)很強的p24抗原特異的IgG抗體。
將rMVA疫苗免疫已經(jīng)接受過DNA+rSeV+rADV疫苗免疫及DNA+rAdV+rSeV疫苗免疫的恒河猴,結(jié)果所有接種疫苗的恒河猴均產(chǎn)生了針對B亞型Gag肽庫的特異性細胞免疫應(yīng)答和P24特異性抗體反應(yīng)。在rMVA疫苗初次免疫后的5~8周間,細胞免疫反應(yīng)達到一個反應(yīng)高峰,在之后的十幾周內(nèi)都能持續(xù)一個相對較高的水平,說明不同載體疫苗的聯(lián)合免疫可以減小機體對載體的免疫應(yīng)答,更
6、久地維持針對病原抗原的細胞免疫應(yīng)答,這對抑制感染者體內(nèi)病毒的擴增有積極的意義。同時也能在恒河猴體內(nèi)誘導(dǎo)較強的體液免疫反應(yīng),峰值產(chǎn)生的時間較之前免疫其他疫苗時早,這可能與之前免疫過含gag基因的疫苗有關(guān),但是這種特異性體液免疫反應(yīng)持續(xù)的時間較短。rMVA疫苗初次免疫后30周進行第二次MVA疫苗的加強免疫,4周后又檢測到了比初次免疫更強的Gag特異性細胞免疫反應(yīng),目前仍在監(jiān)測中。
綜上所述,多種疫苗聯(lián)合應(yīng)用能多次誘導(dǎo)特異性細胞
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