尿激酶型纖溶酶原激活物受體(uPAR)與動(dòng)脈粥樣硬化之間的相關(guān)性研究.pdf

1、纖溶系統(tǒng)不僅介導(dǎo)纖維蛋白的溶解，而且還參與體內(nèi)很多病理生理過(guò)程，例如細(xì)胞遷移、組織重塑以及炎癥反應(yīng)等。尿激酶型纖溶酶原激活物受體(uPAR)作為纖溶系統(tǒng)中一個(gè)重要成員，是一個(gè)具有多種重要生理功能的分子。它可以與細(xì)胞外及細(xì)胞膜上特定分子結(jié)合，如尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)、玻璃體粘連蛋白(VN)、整合素等，從而發(fā)揮重要的生理學(xué)功能。作為一個(gè)糖基化磷脂酰肌醇錨定于細(xì)胞膜上的受體，uPAR除了可以激活細(xì)胞周圍蛋白水解，還參與細(xì)胞黏附、細(xì)胞

2、增殖和趨化等過(guò)程，這些生物學(xué)功能貫穿于動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生演變的始終。越來(lái)越多證據(jù)表明，uPAR在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用，但其中確切的機(jī)制尚未明確。
　　 目的：利用動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的動(dòng)物模型，檢測(cè)斑塊發(fā)展各階段外周血單核細(xì)胞及斑塊內(nèi)部uPAR的表達(dá)水平，探討動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展與uPAR表達(dá)之間的相關(guān)性。
　　 方法：39只純合C57BL/6雄性apoE-/-小鼠喂養(yǎng)至8周齡時(shí)被隨機(jī)分成3個(gè)對(duì)照組(以I、I

3、I、III組表示，每組6只小鼠)和3個(gè)實(shí)驗(yàn)組(以IV、V、VI組表示，每組7只小鼠)，分別喂以高脂飲食和普通飲食。于喂養(yǎng)第10周處死I、IV組，第13周處死II、V組，第16周處死III、VI組，分別測(cè)量每個(gè)動(dòng)物的體重及腹部脂肪重量，留取外周血標(biāo)本、心臟及主動(dòng)脈標(biāo)本(包括頭臂動(dòng)脈)。外周血標(biāo)本通過(guò)流式細(xì)胞儀測(cè)定單核細(xì)胞中uPAR陽(yáng)性細(xì)胞的比例。動(dòng)脈標(biāo)本通過(guò)HE染色尋找并計(jì)數(shù)各期斑塊，通過(guò)免疫熒光及免疫組化的方法測(cè)定斑塊內(nèi)部單核巨噬細(xì)胞及

4、泡沫細(xì)胞中uPAR的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：首先，本研究成功建立了動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的小鼠模型，在三個(gè)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物身上均出現(xiàn)了明確的斑塊，而三個(gè)對(duì)照組動(dòng)物身上卻沒(méi)有發(fā)現(xiàn)任何斑塊。其次，在實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物中，隨著高脂飲食喂養(yǎng)周數(shù)的增加，動(dòng)物的體重及腹部脂肪含量也逐漸增加，各組間存在顯著性差異(p<0.05)；與此同時(shí)，動(dòng)脈斑塊病變的嚴(yán)重程度也逐漸加重，第10周動(dòng)物以早期病變?yōu)橹?，如脂紋，而第16周動(dòng)物則晚期病變?nèi)缋w維斑塊和鈣化斑塊為主。第三

5、，對(duì)外周血單核細(xì)胞uPAR陽(yáng)性率測(cè)定結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，而在3個(gè)實(shí)驗(yàn)組內(nèi)部，隨著高脂喂養(yǎng)周數(shù)增加，外周血單核細(xì)胞uPAR陽(yáng)性率也逐漸升高，3組間存在顯著差異(p<0.01)。斑塊內(nèi)部uPAR表達(dá)量隨著病變嚴(yán)重程度的加重而升高。第四，對(duì)斑塊內(nèi)部uPAR陽(yáng)性的單核巨噬細(xì)胞和泡沫細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行測(cè)定的結(jié)果顯示:鈣化斑塊>纖維斑塊>早期病變?nèi)缰y>正常動(dòng)脈管壁(p<0.05)，而在纖維斑塊或鈣化斑塊內(nèi)部:脂質(zhì)核心或壞死核心>