Osa-miR535,Osa-miR160a等5個miRNAs調控稻瘟病抗性以及水稻農藝性狀的初步研究.pdf

1、h峰7∥一一、毫，(，“JJIJl[1[rrllJlllfr[rllliJiiffrlllllrfl[iJjiiffY3293139竹黃q些!二上@舊SICH腿鰱燕曼碩士學位論文膩amiR535，OsamiRl60a等5個miRNAs調控稻瘟病抗性以及水稻農藝性狀的初步研究李金璐導師組三奎明奎蘊茗晶四刖盔些太坐學科專業(yè)撞物病理堂研究方向撞物埴瘟絲廈剩田2017年5月摘要摘要水稻是人類重要的糧食作物之一，世界上有超過半數(shù)的人口以水稻為主糧

2、。水稻的高產、穩(wěn)產直接關系著全球的糧食安全。miRNAs是植物生長發(fā)育過程中重要的調控因子，廣泛地參與多種生物進程，包括應對環(huán)境刺激，抵抗病原物入侵和影響植物發(fā)育。在實驗的前期工作中，通過高通量測序篩選到30多個與稻瘟病抗性相關的miRNAs。本論文中，我們對其中5個OsamiRNAs對稻瘟病抗性調控分子機理展開研究。通過構建OsamiR535，OsamiRl60，OsamiR2869，OsamiR2871和OsamiRl861的過表達

3、轉基因材料，TargetMimicry轉基因材料和靶基因的過表達轉基因材料。對構建完成的部分轉基因材料進行稻瘟病抗病性鑒定和農藝性狀鑒定。得到如下結果：OsamiR535的幾個預測靶基因Os02909080，Os03914880，Os04947580，OsSPLl4和OsSPLl2的mRNA累積水平在miR535過表達轉基因材料中不同程度的下調，其中OsSPLl4下調最顯著。對miR535過表達轉基因材料接種稻瘟菌，發(fā)現(xiàn)更感稻瘟病，并且

4、檢測到防御相關基因OsPRl，OsNAC4和OsKS4的表達受到抑制。對miR535的TargetMimicry轉基因材料接種稻瘟病菌，發(fā)現(xiàn)更抗稻瘟病，并且OsSPLl4的表達量上調。對水稻抗病材料IRBLkmTs和感病材料LTH接種稻瘟病菌，發(fā)現(xiàn)OsSPLl4在IRBLkmTs中上調表達，在LTH中下調表達。過表達miR535使水稻分蘗增多，穗子減小。過表達miR535的TargetMimicry轉基因材料使水稻分蘗減少。綜上，miR

5、535通過抑制靶基因SPLl4的表達負調控水稻對稻瘟病抗性，并且影響水稻分蘗。過表達miRl60a調控了其5個靶基因的表達，其中三個靶基因被顯著抑制，兩個未被抑制，導致水稻分蘗角度增大，籽粒變大。miRl60a的兩個TargetMimicry轉基因材料eTMl60a和MIMl60a中miRl60a的5個靶基因顯著上調，導致水稻籽粒變小甚至不結實。構建miRl60a的靶基因Os04959430，Os02941800與OsJ0933940過