直腸癌細胞新輔助放化療后超微結構的改變及中藥防治急性放射性腸炎的研究.pdf

1、直腸癌因其較高的發(fā)病率和死亡率被認為是威脅我國人民健康的第五大殺手，目前根治性手術仍然是唯一能根治直腸癌的首選治療手段。但臨床實際中有部分患者就診時已錯過了根治性手術的機會，部分患者即使完成了根治性手術切除，也常常由于腫瘤的復發(fā)和轉移而導致治療失敗。因此，直腸癌新輔助放化療的概念逐漸被提出并開始廣泛的應用于臨床。新輔助放化療可以縮小腫瘤，減滅已經(jīng)存在的微小轉移灶從而達到術前降低腫瘤分期、提高根治性手術切除率、增加低位直腸癌的保肛率及減低

2、術后局部復發(fā)率的目的。2012年NCCN直腸癌治療指南明確新輔助放化療作為局部進展期直腸癌的治療原則。
　　目前從組織病理學及分子生物學角度研究直腸癌細胞損傷的報道較多，利用超微結構觀察細胞損傷的相關研究則較少。超微結構角度的直腸癌細胞結構變化及對直腸癌新輔助放化療的療效評價，對于指導新輔助放化療更好的應用于臨床具有一定的意義。另外，不難發(fā)現(xiàn)接受新輔助放化療后達到病理完全緩解(Pathological complete remis

3、sion，pCR)的病例，對于這類病例的后續(xù)治療方案目前爭議較大。本研究前兩個部分研究立足于上述觀點進行臨床研究的設計，用以驗證新輔助放化療結合的模式相比單獨化療的優(yōu)勢及探討病理完全緩解的病例的是否需要進一步治療。
　　放療在縮小、殺滅腫瘤的同時也會導致很多并發(fā)癥，臨床以急性放射性腸炎(Acuteradiation enteritis，ARE)最常見，嚴重者可導致術前治療的提前終結，甚至需要急診外科手術干預，這對提高直腸癌病例的整

4、體治療效果影響頗大，本研究的第三部分對新輔助放療導致的放射性腸炎進行臨床觀察，利用中藥煎劑保留灌腸的方法，探討清熱解毒方防治放射性腸炎的療效及作用機制，以期為臨床防治急性放射性腸炎提供參考與指導。
　　第一部分直腸癌細胞新輔助放化療后的超微結構改變及癌組織SATB1的表達
　　目的：通過觀察直腸癌細胞在新輔助放化療后超微結構的變化及癌組織SATB1的表達情況，探討新輔助放化療對直腸癌細胞損傷作用的機制，以及新輔助放療敏感性與

5、SATB1的關系。
　　方法：納入2011年7月～2013年12月的83例低位局部進展期直腸癌的患者，其中接受化療者35例，接受聯(lián)合放化療者48例，于治療前、治療中及治療后分別取直腸癌組織及癌旁組織進行電鏡下超微結構觀察，并檢測新輔助放化療前、術后標本的直腸癌組織及癌旁組織SATB1的免疫組化表達。
　　結果：①反應較好的細胞于治療的中期即開始出現(xiàn)凋亡或細胞器的嚴重損傷，出現(xiàn)核固縮，線粒體和內質網(wǎng)的腫脹，反應差的細胞則細胞器

6、沒有破壞或輕度損傷。②接受放療的病例細胞損傷程度明顯高于未接受放療的病例，各種類型的損傷均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);放療對癌細胞的損傷作用較癌旁正常組織明顯。③SATB1在直腸癌組織中的表達比正常直腸粘膜強，且在Ⅲ期直腸癌組織表達最高，差異均具有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。④對放療效果較差的病例，術后標本較術前標本的SATB1表達明顯增高。
　　結論：放療對于直腸癌細胞具有明顯的損傷作用，放化療聯(lián)合對比單純化療導致更明顯

7、的細胞結構的損傷，并增加了對細胞核的破壞。SATB1的表達與腫瘤浸潤程度有關，且其過度表達與放療抵抗有一定的相關性。
　　第二部分;低位局部進展期直腸癌新輔助放化療的近期療效評價及病理完全緩解病例的后續(xù)治療方案
　　目的：評價直腸癌新輔助放化療的有效性及安全性，探討低位直腸癌新輔助放化療后病理完全緩解病例的后續(xù)治療方案。
　　方法：①回顧性分析2008年1月～2014年01月納入的166例低位局部進展期直腸癌的患者，其

8、中接受化療者70例，接受聯(lián)合放化療者96例，比較兩組的不良反應發(fā)生率、腫瘤緩解情況、組織病理學療效、術后并發(fā)癥發(fā)生率、腫瘤切除率和保肛率等指標的變化。②回顧性分析14例接受新輔助放化療后達到病理完全緩解病例的臨床資料。
　　結果：①兩組間不良反應除大便性狀改變和皮膚黏膜損傷發(fā)生率聯(lián)合組高于化療組外(x2值=13.898，P=0.002;x2值=10.747，P=0.008)，其余無明顯差異;聯(lián)合組腫瘤緩解率(x2值=10.214，

9、P=0.001)，組織病理學腫瘤消退率（x2值=10.386，P=0.001）均高于化療組;聯(lián)合組根治性切除率(x2值=4.356，P=0.037)及保肛率(x2值=4.352，P=0.037)亦高于化療組;術后并發(fā)癥兩組無顯著差異。②14例病理完全緩解的患者中接受手術者10例，隨訪發(fā)現(xiàn)，未手術者中有3例復發(fā)轉移，其中1例死亡;手術病例中2例復發(fā)，無死亡病例。
　　結論：①新輔助放化療具有明顯的細胞損傷作用，對于直腸癌的降期，提高

10、手術根治性切除率和保肛率具有明顯優(yōu)勢，且無明顯不良反應及嚴重手術并發(fā)癥。②接受新輔助放化療達到病理完全緩解的病例，應接受規(guī)范的全直腸系膜切除術以達到根治的目的。
　　第三部分清熱解毒方保留灌腸防治急性放射性腸炎的療效研究
　　目的：中藥煎劑灌腸治療急性放射性腸炎的療效觀察及機理探討。
　　方法：納入2011年7月～2013年12月直腸癌病例共48例，隨機分為中藥灌腸治療組24例及對照組24例，治療組自放療開始予中藥煎劑

11、灌腸治療，療程至放療結束。統(tǒng)計兩組病例各級放射性腸炎的發(fā)生率，觀察腸粘膜組織病理學變化及超微結構變化。
　　結果：①治療組經(jīng)中藥灌腸干預后，未發(fā)生放射性腸炎的病例數(shù)明顯多于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(x2值=4.923,P=0.027)。兩組間1級和3級放射性腸炎的發(fā)生率無顯著差異，但治療組2級放射性腸炎的發(fā)生率明顯低于對照組(x2值=5.829，P=0.016）。②治療組炎癥細胞的浸潤及黏膜潰瘍的發(fā)生率均低于對照組，差異具有統(tǒng)計

12、學意義(x2值=4.246，P=0.039;x2值=4.148，P=0.042);腺體增生變形的發(fā)生率及粘液分泌增多的發(fā)生率亦顯著低于對照組(x2值=4.932，P=0.027;x2值=4.090，P=0.043)，但小血管的變化兩組間無顯著差異(x2值=2.116，P=0.146)。③透射電鏡下的超微結構觀察到治療組病例的粘液顆粒增加比例顯著低于對照組(x2值=5.371，P=0.020)。
　　結論：①中藥煎劑灌腸能很好地預防