芥藍(lán)芥子油苷組分及其醌還原酶誘導(dǎo)活性和抗蟲性分析.pdf

1、芥藍(lán)是中國特產(chǎn)蔬菜，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值，值得深入開發(fā)利用。芥子油苷是一類與癌癥的化學(xué)預(yù)防、植物對(duì)病蟲害的抗性密切相關(guān)的次生代謝物質(zhì)。芥藍(lán)中芥子油苷的含量非常豐富，本研究以芥藍(lán)為材料，研究了芥藍(lán)不同發(fā)育時(shí)期芥子油苷組分和含量的變化，不同品種芥藍(lán)食用器官醌還原酶誘導(dǎo)活性的差異，以及生物脅迫(蟲傷)對(duì)芥藍(lán)中芥子油苷組分的影響。主要結(jié)果如下： (1)發(fā)展了一種有效的HPLC芥子油苷分析方法，利用該方法對(duì)已獲得的十三個(gè)芥藍(lán)品種在萌動(dòng)種子期

2、、子葉期、4～6片真葉期及成熟花薹等不同發(fā)育時(shí)期的芥子油苷組分進(jìn)行了分析。芥藍(lán)中的主要脂肪類芥子油苷為4-甲基硫氧丁基GS(蘿卜硫苷)和3-丁烯基GS。芥藍(lán)中的吲哚類芥子油苷主要為3-吲哚基甲基，4-甲氧基-3-吲哚基和1-甲氧基-3-吲哚基甲基，其中以3-吲哚基甲基含量較為豐富；芥藍(lán)中不含芳香類芥子油苷。蘿卜硫苷的降解產(chǎn)物蘿卜硫素是迄今為止發(fā)現(xiàn)的抗癌活性最強(qiáng)的一種天然植物化學(xué)物質(zhì)，通過特異性地調(diào)節(jié)致癌代謝來強(qiáng)烈地阻遏癌癥的發(fā)生，同時(shí)還

3、能誘導(dǎo)人體細(xì)胞系中癌癥細(xì)胞的程序化死亡，在癌癥的化學(xué)預(yù)防中發(fā)揮重要作用。芥子油苷分析結(jié)果表明，不同品種之間芥子油苷組分和含量差異較大，4～6片真葉期的幼株和成熟花薹是芥藍(lán)的主要食用器官，不同品種芥藍(lán)食用器官蘿卜硫苷含量差異較大，其中JL-SNZH食用器官蘿卜硫苷含量顯著高于其它品種。不同發(fā)育時(shí)期芥藍(lán)芥子油苷組分的變化表現(xiàn)為萌動(dòng)種子的芥子油苷含量顯著高于其他時(shí)期，子葉期的芥子油苷含量最低。一些品種，如JL-FZHH等萌動(dòng)種子中的蘿卜硫苷很

4、高，可用于開發(fā)抗癌功能食品。芥藍(lán)含豐富的脂肪類芥子油苷，而吲哚類芥子油苷的含量相對(duì)較低，不同品種，不同時(shí)期吲哚類芥子油苷存在一些差異，吲哚類芥子油苷在芥藍(lán)不同發(fā)育時(shí)期的生物學(xué)功能有待于進(jìn)一步研究。 (2)研究了不同提取方法，不同細(xì)胞裂解劑和QR反應(yīng)液的培育時(shí)間對(duì)醌還原酶法(QR法)分析的影響。結(jié)果表明，芥藍(lán)組織用磷酸緩沖液(5mMK2HPO4-KH2PO4，1mMEDTA，pH7.6)提取效果良好，與常用的三元試劑提取法效果相當(dāng)

5、。這種方法簡(jiǎn)單而有效，優(yōu)于其它有機(jī)溶劑提取法。0.4％乙基苯基聚乙二醇(NonidetP-40，NP40)可以替代細(xì)胞裂解劑-0.8％毛地黃皂苷(digitonin)用于QR分析，且效果良好，QR反應(yīng)中反應(yīng)液的培育時(shí)間以5-10min為宜。同時(shí)，我們還分析了芥藍(lán)13個(gè)品種食用器官(花薹和幼株)的QR誘導(dǎo)潛能，并對(duì)不同品種食用器官在適宜濃度(1mg/ml)下的QR誘導(dǎo)活性進(jìn)行了比較分析，結(jié)果表明JL-SNZH的QR誘導(dǎo)潛能和QR誘導(dǎo)活性顯

6、著高于其它品種，這可能與其食用器官蘿卜硫苷含量顯著高于其它品種有關(guān)。 (3)研究了芥藍(lán)對(duì)煙粉虱成蟲存活和生殖的影響以及不同品種芥藍(lán)在發(fā)生生物脅迫(B型煙粉虱侵染)后體內(nèi)芥子油苷組分和含量的變化。結(jié)果表明，煙粉虱在芥藍(lán)不同品種中均能存活，但不同品種間存活率差異不顯著；煙粉虱的每蟲產(chǎn)卵量在品種間存在差異，JL-DFZC和JL-NPSJ的每蟲產(chǎn)卵量顯著低于其它品種。煙粉虱取食后48h芥藍(lán)中芥子油苷組分分析表明，甜脆柳葉芥藍(lán)的脂肪類芥子