移植脂肪干細胞對血管損傷后內(nèi)膜增生的影響及機制研究.pdf

1、目的：
　　探討移植脂肪干細胞對球囊損傷后大鼠頸動脈內(nèi)膜增生的影響及其機制，為防治血管損傷后形成的再狹窄提供新的治療思路。
　　方法：
　　45只雄性SD大鼠，隨機分為3組：對照組（假手術(shù)），球囊損傷組，ADMSC組（球囊損傷+ADMSC移植治療）。對照組僅予頸部切開縫合，球囊損傷組進行左側(cè)頸總動脈球囊損傷，ADMSC組在血管損傷同時予以脂肪干細胞移植治療。在術(shù)后的第1周，第2周，第4周時處死大鼠，取左側(cè)頸總動脈，觀察

2、綠熒光蛋白標記的ADMSC在頸總動脈的定植情況；經(jīng)HE染色光鏡下觀察頸總動脈內(nèi)膜增生的情況。RT-PCR法檢測頸總動脈eNOS基因的表達。Western blotting測定頸總動脈p27蛋白、p21蛋白以及增殖細胞核抗原蛋白（PCNA）的水平。ELISA法測定血清中NO的水平。
　　結(jié)果：
　　1.移植ADMSC后第一周，可見有綠熒光蛋白陽性的脂肪干細胞附著定植于血管內(nèi)面，術(shù)后第2周仍可見。
　　2.球囊損傷組大鼠的

3、頸總動脈W/L（血管壁/腔比）(1.24±0.08)明顯高于對照組（0.38±0.09）,P<0.01；經(jīng)ADMSC移植治療后與球囊損傷組相比，W/L的降低具有顯著的統(tǒng)計學意義（0.63±0.05VS1.24±0.08;P<0.01)。
　　3.球囊損傷術(shù)后1,2,4周頸總動脈p27，p21蛋白的表達水平與同期對照組相比，均明顯增高,差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），并且呈時間依賴性增加，于術(shù)后第4周到達高峰(各組間P均<0.

4、05)；球囊損傷組PCNA的表達與對照組相比，具有顯著的統(tǒng)計學差異(0.43±0.05VS0.07±0.04，P<0.01)，其表達水平在術(shù)后一周達到高峰，隨后下降。
　　4.以表達高峰的第4周為時間點，取頸總動脈檢測p21蛋白，結(jié)果顯示其在ADMSC組（0.21±0.03）的表達明顯高于球囊損傷組（0.47±0.06），且差異具有顯著的統(tǒng)計學意義(P<0.01)；而同一時間點p27的表達，在ADMSC組和球囊損傷組之間也存在著顯

5、著的統(tǒng)計學差異（0.26±0.07VS0.53±0.07）。在PCNA表達高峰的術(shù)后第1W取血管檢測，顯示其在ADMSC組（0.51±0.08）的水平明顯低于球囊損傷組（0.78±0.09），P<0.05。
　　5.術(shù)后4W取血管進行RT-PCR檢測：對照組的eNOS表達水平（1.95±0.17）明顯高于球囊損傷組（0.29±0.06VS1.95±0.17；P<0.01）和ADMSC組（1.36±0.24VS1.95±0.17;P

6、<0.01）,然而經(jīng)ADMSC治療的大鼠，其eNOS表達水平又明顯高于球囊損傷組,(P<0.05)。
　　6.血清ELISA檢測結(jié)果顯示對照組大鼠的NO分泌水平要高于其余兩組，且差異均具有顯著的統(tǒng)計學意義（P<0.01）。而球囊損傷組大鼠與經(jīng)ADMSC治療的大鼠相比，其血清NO水平明顯較低（56.37±9.91VS75.83±3.67；P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.移植的脂肪干細胞可以定植于損傷血管，抑制球囊損