紅景天苷通過上調(diào)mTOR通路恢復(fù)自噬拮抗高糖誘導(dǎo)的心肌細胞凋亡.pdf

1、目的：
　　持續(xù)性高血糖（persistent hyperglycemia）具有心肌毒性，可以導(dǎo)致心肌細胞的凋亡。傳統(tǒng)中藥紅景天的活性成分紅景天苷（salidroside）具有一定的抗細胞凋亡作用。本研究旨在探討紅景天苷通過恢復(fù)心肌細胞自噬活性拮抗高濃度葡萄糖誘導(dǎo)的細胞凋亡以及其潛在機制。
　　方法：
　　使用 CCK-8法檢測不同濃度（50，150，250μM）紅景天苷及高濃度葡萄糖作用下心肌細胞活力，根據(jù)相關(guān)參考文

2、獻及預(yù)實驗結(jié)果，選定葡萄糖（20mM）處理 H9C2細胞，并加入不同濃度的紅景天苷（50，150，250μM）處理進行后續(xù)試驗，并設(shè)立空白對照組(0mM)。提取H2C9細胞蛋白,使用ELISA法檢測凋亡蛋白caspase-3活性以及自噬蛋白BECN1活性，心肌細胞H9C2同樣使用葡萄糖（20mM）及不同濃度的紅景天苷（50，150，250μM）處理24h后，提取細胞蛋白，檢測其中 caspase-3活性以及自噬蛋白 BECN1活性，并使

3、用mTOR特異性阻滯劑雷帕霉素（RAPA）阻斷 mTOR通路，評估細胞凋亡及自噬情況。使用免疫熒光法觀察 LC-3在心肌細胞的表達情況，通過細胞核中熒光程度評估細胞自噬活性。
　　結(jié)果：
　　高濃度葡萄糖抑制了心肌細胞的自噬活性，并誘導(dǎo)其凋亡；紅景天苷則可以恢復(fù)心肌細胞自噬活性，從而拮抗高濃度葡萄糖誘導(dǎo)的凋亡；RAPA（mTOR特異性阻滯劑）逆轉(zhuǎn)了紅景天苷對自噬的恢復(fù)以及高濃度葡萄糖誘導(dǎo)的心肌細胞凋亡的拮抗作用。