金黃色葡萄球菌B型腸毒素（SEB）對(duì)肉雞的損傷作用研究.pdf

1、33日齡健康艾維因肉雞72羽，經(jīng)2周適應(yīng)性飼養(yǎng)后，隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，每組36羽，試驗(yàn)組經(jīng)關(guān)節(jié)腔注射金黃色葡萄球菌B型腸毒素(SEB)50μg/ml1ml，對(duì)照組雞只同部位注射等量滅菌生理鹽水，隔離飼養(yǎng)，觀察各組雞只臨床癥狀和病理變化，并于注射后第1、3、5、7、14、21d，各組取6羽雞由貴要靜脈采血，進(jìn)行WBC計(jì)數(shù)及分類(lèi)計(jì)數(shù)，同時(shí)做外周血的T淋巴細(xì)胞酯酶染色；取每羽雞的各常規(guī)組織器官石蠟包埋、切片，HE染色，光鏡觀察組織病變；對(duì)

2、肝、腎組織做自由基MDA含量及SOD活性檢測(cè)；對(duì)腎、法氏囊做透射電鏡取材、處理，電鏡觀察組織變化；對(duì)腎做TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)；對(duì)腎做Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)檢測(cè)。通過(guò)以上指標(biāo)的測(cè)定，以期探明SEB進(jìn)入機(jī)體后，對(duì)機(jī)體的損傷作用。 通過(guò)對(duì)外周血的WBC計(jì)數(shù)，其結(jié)果顯示，試驗(yàn)組雞只在注射GEB后第1d，白細(xì)胞數(shù)量迅速上升，到第3d上升到最高后，慢慢減少，到第21d下降到和對(duì)照組同一水平。其中第1、3、7d極顯著高于對(duì)照組(p<0.

3、01)，第5、14d顯著高于對(duì)照組(p<0.05)，第21d和對(duì)照組差異不顯著。WBC分類(lèi)計(jì)數(shù)結(jié)果顯示異嗜性粒細(xì)胞在第1d有所下降，但是和對(duì)照組差異不顯著，在第14d上升到最高，顯著高于對(duì)照組(p<0.05)，第21d下降和對(duì)照組差異不顯著；嗜酸性粒細(xì)胞在第1d顯著高于對(duì)照組(p<0.05)，其余時(shí)間段和對(duì)照組差異不顯著；嗜堿性粒細(xì)胞在第1d極顯著高于對(duì)照組(p<0.01)，第14d顯著高于對(duì)照組(p<0.05)，其余時(shí)間段和對(duì)照組差異

4、不顯著；淋巴細(xì)胞在第1d極顯著高于對(duì)照組(p<0.01)，其余時(shí)間段和對(duì)照組差異不顯著；單核細(xì)胞在整個(gè)試驗(yàn)周期，和對(duì)照組差異不顯著。 T淋巴細(xì)胞酯酶染色結(jié)果顯示：試驗(yàn)組的T淋巴細(xì)胞在注射SEB后第1d開(kāi)始上升，到第7d上升到最高，然后逐漸下降，第3d和對(duì)照組差異顯著(p<0.05)，第5、7、14、21d和對(duì)照組差異極顯著(p<0.01)。 肝、腎組織中MDA含量及SOD活性檢測(cè)結(jié)果顯示：在注射SEB后肝組織MDA含量立

5、刻上升，在第1d顯著高于對(duì)照組(p<0.05)，第3d上升到最高，極顯著高于對(duì)照組(p<0.01)，第5d逐漸下降，但仍顯著高于對(duì)照組(p<0.05)，第7、14、21恢復(fù)到正常水平，和對(duì)照組差異不顯著；試驗(yàn)組SOD活性在第1、5、7d顯著低于對(duì)照組(p<0.05)，第3d和對(duì)照組差異不顯著，第21d極顯著低于對(duì)照組(p<0.01)；在注射毒素SEB后腎組織MDA含量立刻上升，且在整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，試驗(yàn)組雞只的MDA含量一直高于對(duì)照組雞只

6、水平，并在注射后第3d、7d、14d極顯著高于對(duì)照組(p<0.01)，在注射后第21d顯著高于對(duì)照組(p<0.05)；試驗(yàn)組SOD活性在注射后第1d極顯著低于對(duì)照組(p<0.01)；第21d顯著低于對(duì)照組(p<0.05)；第3d、5d、7d、14d和對(duì)照組差異不顯著。腎組織TUNEL染色結(jié)果顯示：試驗(yàn)組在前期(注射SEB后第1-5d)，TUNEL染色呈陽(yáng)性表達(dá)；到中后期(即注射SEB后第7-21d)，腎臟組織中TUNEL染色呈陰性表達(dá)，

7、對(duì)照組均為陰性表達(dá)。 腎組織Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果顯示：在注射SEB后的第1、3、5d，Bax蛋白的表達(dá)較高；而B(niǎo)cl-2蛋白在第5、7d的表達(dá)較高，其余時(shí)間段和對(duì)照組差別不大，均呈陰性表達(dá)。 組織切片的光鏡、電鏡觀察結(jié)果顯示：SEB主要引起腎組織的損傷，在試驗(yàn)初期(即注射毒素后第1-5d)，有輕微出血現(xiàn)象，同時(shí)在40倍光鏡及油鏡下能看到少量細(xì)胞呈凋亡性變化；中期(即注射SEB后第7-14d)，光鏡下發(fā)現(xiàn)腎小

8、管上皮細(xì)胞出現(xiàn)壞死，核濃縮、碎裂，腎小球腫脹，充滿囊腔，近曲小管上皮細(xì)胞發(fā)生變性、廣泛性壞死，對(duì)第14d的腎臟做透射電鏡檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)腎小管上皮細(xì)胞膜溶解，有的線粒體濃縮，有的線粒體腫脹，嵴斷裂，細(xì)胞器崩解，形成空泡，核染色質(zhì)邊移，腎小球血管基底膜厚度增寬，足細(xì)胞足突少量融合，上皮細(xì)胞空泡樣變、壞死；后期(即注射毒素后第21d)，腎臟出血嚴(yán)重，整個(gè)腎小管上皮細(xì)胞幾乎全部壞死，組織出現(xiàn)壞死灶。另外，肝臟、脾臟、法氏囊均表現(xiàn)出不同程度的細(xì)胞壞死