棉鈴蟲細(xì)胞HzAm1的低血清培養(yǎng)優(yōu)化研究.pdf

1、昆蟲細(xì)胞一桿狀病毒表達(dá)體系給真核生物重組醫(yī)用蛋白和生物殺蟲劑的工業(yè)化生產(chǎn)帶來(lái)了希望。為了提高桿狀病毒在昆蟲細(xì)胞中的復(fù)制量或重組蛋白在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)量，傳統(tǒng)的方法是在昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基中添加10％左右的胎牛血清。由于血清成本高、來(lái)源少，而且血清成份復(fù)雜，還是支原體和其它異源病毒污染的重要來(lái)源，給基因工程表達(dá)的重組蛋白的下游分離處理發(fā)展帶來(lái)了困難，因此，用這一體系進(jìn)行大規(guī)模的商業(yè)化生產(chǎn)還存在著一定的挑戰(zhàn)。
　　 本課題從三種商業(yè)化的培

2、養(yǎng)基TC-100、IPL-41以及Grace's中篩選出最適合棉鈴蟲細(xì)胞HzAml生長(zhǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基TC-100，然后以該培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，補(bǔ)加一定量的水解乳蛋白以及酵母提取物等，可以將血清用量從常用的10％降至1％，進(jìn)行棉鈴蟲細(xì)胞HzAml低血清培養(yǎng)的研究。在此基礎(chǔ)上，通過(guò)將較為廉價(jià)的Grace's培養(yǎng)基中加入一些如酵母提取物、水解乳蛋白、脂類復(fù)合物、氫化可的松、氨基酸以及鋅、鉬、錳微量元素，對(duì)Grace's培養(yǎng)基進(jìn)行改善，在血清為5％的條