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文檔簡(jiǎn)介
1、昆蟲細(xì)胞一桿狀病毒表達(dá)體系給真核生物重組醫(yī)用蛋白和生物殺蟲劑的工業(yè)化生產(chǎn)帶來(lái)了希望。為了提高桿狀病毒在昆蟲細(xì)胞中的復(fù)制量或重組蛋白在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)量,傳統(tǒng)的方法是在昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基中添加10%左右的胎牛血清。由于血清成本高、來(lái)源少,而且血清成份復(fù)雜,還是支原體和其它異源病毒污染的重要來(lái)源,給基因工程表達(dá)的重組蛋白的下游分離處理發(fā)展帶來(lái)了困難,因此,用這一體系進(jìn)行大規(guī)模的商業(yè)化生產(chǎn)還存在著一定的挑戰(zhàn)。
本課題從三種商業(yè)化的培
2、養(yǎng)基TC-100、IPL-41以及Grace's中篩選出最適合棉鈴蟲細(xì)胞HzAml生長(zhǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基TC-100,然后以該培養(yǎng)基為基礎(chǔ),補(bǔ)加一定量的水解乳蛋白以及酵母提取物等,可以將血清用量從常用的10%降至1%,進(jìn)行棉鈴蟲細(xì)胞HzAml低血清培養(yǎng)的研究。在此基礎(chǔ)上,通過(guò)將較為廉價(jià)的Grace's培養(yǎng)基中加入一些如酵母提取物、水解乳蛋白、脂類復(fù)合物、氫化可的松、氨基酸以及鋅、鉬、錳微量元素,對(duì)Grace's培養(yǎng)基進(jìn)行改善,在血清為5%的條
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