膽紅素腦病仔鼠腦組織S-100、NSE的mRNA和其蛋白水平變化研究.pdf

1、目的：研究新生7日齡仔鼠腦組織S-100蛋白(S-100protein,S-100)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specificenolase，NSE)、髓鞘堿性蛋白(myelinbasicprotein，MBP)對(duì)膽紅素腦病的診斷價(jià)值及其變化機(jī)制。 方法：選用新生7日齡清潔級(jí)Wistar大鼠120只，隨機(jī)分為對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組，每組再按六個(gè)時(shí)間點(diǎn)(6h、12h、24h、48h、72h、96h)分為6組，各組均為10只仔鼠

2、。對(duì)照組仔鼠給予腹腔注射生理鹽水0.5ml，實(shí)驗(yàn)組仔鼠給予腹腔注射膽紅素200mg/kg制成膽紅素腦病模型。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)動(dòng)態(tài)觀察膽紅素腦病仔鼠不同時(shí)間點(diǎn)腦組織S-100、NSE的mRNA表達(dá)的變化；應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法動(dòng)態(tài)觀察不同時(shí)間點(diǎn)腦組織S-100、NSE、MBP蛋白表達(dá)的變化，探討哪種神經(jīng)生化標(biāo)志物更能準(zhǔn)確反映膽紅素腦病仔鼠腦組織損傷的程度。 結(jié)果：1.實(shí)驗(yàn)組腦組織S-100mRNA表達(dá)6h

3、開始升高，但與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，12h明顯升高，48h達(dá)峰值，72h下降，至96h與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，但仍高于對(duì)照組；2.實(shí)驗(yàn)組腦組織NSEmRNA表達(dá)6h開始明顯下降，而實(shí)驗(yàn)組各組之間及對(duì)照組各組之間差異無(wú)顯著性；3.造模后6h海馬區(qū)腦組織S-100陽(yáng)性表達(dá)升高，但與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，12h明顯升高，48h達(dá)峰值，72h下降，至96h與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，但仍明顯高于對(duì)照組。而皮質(zhì)區(qū)腦組織S-100陽(yáng)性表達(dá)6h明

4、顯升高，48h達(dá)峰值，72h下降，至96h與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，但仍高于對(duì)照組；4.造模后6h丘腦區(qū)腦組織S-100陽(yáng)性表達(dá)明顯升高，72h下降，至96h與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，但仍高于對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組48hS-100陽(yáng)性表達(dá)明顯高于所有實(shí)驗(yàn)組。而蒼白球區(qū)腦組織S-100陽(yáng)性表達(dá)6h明顯升高，48h達(dá)峰值，72h下降，至96h與對(duì)照組比較仍有顯著性差異；5.造模后6h海馬區(qū)腦組織NSE陽(yáng)性表達(dá)下降，但實(shí)驗(yàn)組各組與其各自對(duì)照組比較無(wú)顯

5、著性差異，而皮質(zhì)區(qū)腦組織NSE陽(yáng)性表達(dá)6h～96h均明顯下降，與對(duì)照組比較均有顯著性差異；6.造模后6h丘腦區(qū)腦組織NSE陽(yáng)性表達(dá)下降，但與其對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，實(shí)驗(yàn)組24h、72h與其對(duì)照組比較差異有顯著性；蒼白球區(qū)腦組織NSE陽(yáng)性表達(dá)6h～96h明顯下降，與對(duì)照組比較均有顯著性差異；7.實(shí)驗(yàn)組海馬區(qū)腦組織MBP陽(yáng)性表達(dá)6h顯著降低，之后開始升高，至72h與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異；皮質(zhì)區(qū)6h開始降低，但與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異，至

6、96h與對(duì)照組有顯著性差異。8.與對(duì)照組比較，丘腦、蒼白球區(qū)腦組織MBP陽(yáng)性表達(dá)均低于對(duì)照組，二者與對(duì)照組比較差異均無(wú)顯著性。各自對(duì)照組各組之間及實(shí)驗(yàn)組各組之間比較無(wú)顯著性差異。 結(jié)論：1.腦組織S-100mRNA在膽紅素腦病后12小時(shí)明顯升高，48小時(shí)達(dá)峰值，繼而下降；NSEmRNA在膽紅素腦病后6小時(shí)開始下降，持續(xù)至96小時(shí)；2.腦組織海馬、皮質(zhì)、丘腦、蒼白球區(qū)S-100蛋白在膽紅素腦病后6小時(shí)開始升高，48小時(shí)達(dá)峰值，繼而