急性高眼壓致大鼠角膜內皮細胞損傷過程中TRPC4通道蛋白的表達變化.pdf

1、目的：目前青光眼的治療方案主要是采用抑制房水生成、促進房水循環(huán)、視神經營養(yǎng)保護的藥物以及各種手術方法來降低眼壓，保護視神經。除了視神經受損，角膜內皮細胞密度在高壓刺激下也會降低，但臨床上缺乏早期對角膜內皮細胞損傷的預防性治療，致使青光眼病人高眼壓急性發(fā)作后內皮細胞密度明顯減少，以后在進行復雜的內眼手術甚至使用抗青光眼藥物都極易引起角膜內皮失代償。隨著近年來對角膜內皮細胞壓力損傷機制的研究進展，大量新的治療靶點相繼被發(fā)現(xiàn)。本實驗首次研究在

2、急性高眼壓刺激作用下SD大鼠角膜內皮細胞中TRPC4通道的表達變化，結合TRPC4通道的生理功能，探討TRPC4通道與角膜內皮細胞凋亡的相關性。
　　方法：健康純種SD大鼠26只，雌雄兼?zhèn)?，隨機分為空白對照組（13只）和實驗組（13只）。空白對照組雙眼不造模，實驗組雙眼造急性高眼壓模型。1，熒光顯微鏡觀察臺盼藍-茜素紅染色后實驗組和對照組角膜內皮細胞的變化，計算活細胞率；2，實時熒光定量PCR檢測TRPC4在RNA水平的表達變化；

3、3，HE染色和免疫組織化學染色觀察實驗組和對照組角膜內皮細胞形態(tài)及結構變化，同時觀察TRPC4通道在蛋白質水平的表達變化。
　　結果：1，臺盼藍-茜素紅染色：實驗組角膜內皮細胞六角形細胞數(shù)目減少，大量細胞受到破壞或者已死亡，活細胞率較對照組明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。2，實時熒光定量PCR：實驗組TRPC4的RNA表達量是對照組的4倍。3，H E染色和免疫組織化學染色：實驗組角膜內皮細胞密度降低，免疫組化染色均呈