廣西產(chǎn)地線生藥鑒別及體外抗乙肝病毒實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：①對(duì)廣西產(chǎn)地錢(qián)進(jìn)行進(jìn)行生藥鑒別。②以乙型肝炎病毒(HBV)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株2.2.15細(xì)胞為靶細(xì)胞，觀察拳卷地錢(qián)總黃酮在該細(xì)胞系中對(duì)細(xì)胞的毒性、HBsAg和HBeAg分泌的抑制作用，同時(shí)研究并分析拳卷地錢(qián)總黃酮對(duì)2.2.15細(xì)胞HBV-DNA復(fù)制的抑制作用。方法：①以薄層色譜法(TLC)和槲皮素、木犀草素等多種黃酮類對(duì)照品，對(duì)廣西產(chǎn)地錢(qián)進(jìn)行試驗(yàn)性鑒別。②接種2.2.15細(xì)胞24h后，加入拳卷地錢(qián)總黃酮培養(yǎng)9天，觀察細(xì)胞病變，用噻唑鹽(

2、MTT)比色分析法檢測(cè)拳卷地錢(qián)總黃酮對(duì)2.2.15細(xì)胞的毒性。③在無(wú)毒的藥物濃度下，將藥物加入2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)3、6、9天，收集培養(yǎng)液，分別測(cè)定HBsAg和HBeAg水平。④將藥物加入2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)9天，提取細(xì)胞的DNA，用HBV-DNA探針作斑點(diǎn)雜交，對(duì)斑點(diǎn)進(jìn)行定量分析。結(jié)果：①三種地錢(qián)的TLC圖譜有明顯區(qū)別。②拳卷地錢(qián)總黃酮對(duì)細(xì)胞的最大無(wú)毒濃度為40μg·ml-1；第3、6、9天時(shí)，40μg·ml-1的拳卷地錢(qián)總黃酮對(duì)2.

3、2.15細(xì)胞HBeAg、HBsAg分泌抑制率分別為28.53％、28.68％；36.35％、31.45％；44.68％、48.78％，隨著時(shí)間和劑量的增加，拳卷地錢(qián)總黃酮對(duì)2.2.15細(xì)胞HBeAg、HBsAg分泌抑制作用增強(qiáng)，對(duì)HBeAg和HBsAg分泌抑制的半數(shù)有效濃度IC50分別為17.11μg·ml-1和17.90μg·ml-1；拳卷地錢(qián)總黃酮對(duì)HBV-DNA抑制率為31.52％，且呈劑量反應(yīng)關(guān)系。結(jié)論：①通過(guò)生藥學(xué)鑒別研究，該