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文檔簡介
1、目的：（1）觀察順鉑導致人卵巢癌SKOV3細胞藥物耐受后細胞凋亡情況。探討DNA錯配修復基因hMLH1、hMSH12的在人卵巢癌細胞SKOV3及耐順鉑人卵巢癌細胞SKOV3/DDP中的轉(zhuǎn)錄與翻譯表達變化。（2）探討耐順鉑人卵巢癌細胞SKOV3/DDP中凋亡基因bax、bcl-2、caspase9的轉(zhuǎn)錄與翻譯表達變化，為進一步研究凋亡途徑異常提供實驗室依據(jù)。
方法：（1）在第一部分細胞培養(yǎng)實驗中，采甩MTT法、Hoechst
2、免疫熒光染色觀察順鉑對卵巢癌SKOV3細胞和卵巢癌順鉑耐藥SKOV3/DDP細胞凋亡情況，檢測SKOV3fDDP細胞耐藥性。使用RT-PCR技術(shù)及Western blotting技術(shù)分別檢測順鉑敏感性人卵巢癌SKOV3細胞及耐順鉑人卵巢癌SKOV3/DDP胞中錯配修復基因hMLH1和hMSH2的轉(zhuǎn)錄與翻譯表達變化情況。
（2）在第二部分實驗中，使用RT-PCR技術(shù)及Western-blotting技術(shù)分別檢測順鉑敏感性人卵
3、巢癌SKOV3細胞及耐順鉑人卵巢癌SKOV3/DDP細胞中凋亡相關(guān)基因bc1-2、bax、caspase9的轉(zhuǎn)錄與翻譯表達變化情況。
結(jié)果：（1）同一順鉑濃度作用下，耐順鉑人卵巢癌細胞的凋亡率明顯低于順鉑敏感性人卵巢癌細胞。順鉑敏感性人卵巢癌細胞的錯配修復基因hMLH1和hMSH2的mRNA及蛋白表達水平均顯著高于耐順鉑人卵巢癌細胞。
（2）順鉑敏感性人卵巢癌細胞的凋亡相關(guān)基因bax、caspase9的mRN
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