塞來昔布對U251膠質瘤細胞增殖及凋亡的影響及分子機制.pdf

1、目的:
　　 探討塞來昔布(Celecoxib)對體外培養(yǎng)的人惡性膠質瘤細胞(U251)的增殖影響,以及塞來昔布不同濃度對核因子(NF-κB)在細胞內表達的分布的影響,進一步探討其可能的作用機制
　　 方法:
　　 人膠質瘤細胞(U251)分別在用藥組(分別以含Cele濃度0、10、25、50、100umol/1的培養(yǎng)液作用)和聯合用藥組(用藥組中加入了腫瘤壞死因子FNF-α50ng/ml)中體外培養(yǎng)24h。應用

2、甲基噻唑藍(MTT)法檢測細胞增殖的影響,用MaxVisionTM免疫細胞化學法觀察NF-κB(p65)蛋白在塞來昔布和TNF-α對細胞刺激后在U251細胞的亞細胞分布,用western blot檢測細胞核內NF-κB(p65)蛋白在細胞核內的表達。
　　 結果:
　　 甲基噻唑藍(MTT)法結果顯示,不同濃度的塞來昔布(Celecoxib)對細胞生長均有一定的抑制作用,且Celecoxib對細胞的抑制作用呈劑量依賴性,

3、而與TNF-α的聯合作用并沒有協同效應(P>0.05)。
　　 免疫細胞化學示:靜息狀態(tài)下的U251細胞內的NF-κB(p65)蛋白核內外都有分布。而用50ng/m; TNF-α刺激U251細胞30分后,細胞內的p65蛋白明顯從細胞漿向細胞核轉移。而用塞來昔布預處理1h后聯合TNF-α作用于U251細胞,可以明顯的抑制NF-κ B(p65)的細胞核移位。并且不同濃度的塞來昔布作用細胞,通過western blot檢測其p65蛋白