內(nèi)源性一氧化碳、血紅素氧合酶在局灶性腦缺血中作用機理的實驗研究.pdf

1、第一部分,大鼠局灶性腦缺血模型的制作及判定.目的：建立能復制的、穩(wěn)定的局灶性腦缺血大鼠模型.方法：將大鼠隨機分為兩組,一組采用經(jīng)頸外動脈插線法栓塞大鼠大腦中動脈（MCAO）致腦缺血模型,一組為假手術組,線栓只插到頸內(nèi)、頸外動脈分叉處.分別觀察兩組動物的行為、梗死灶形態(tài)學及核磁共振特征.結論：經(jīng)頸外動脈插線法栓塞大鼠大腦中動脈致腦缺血是可復制的、穩(wěn)定的局灶性腦缺血模型.第二部分,內(nèi)源性一氧化碳對大鼠局灶性缺血腦組織病理生理的影響.目的：觀

2、察內(nèi)源性一氧化碳濃度改變對局灶性缺血腦組織病理生理的影響,試圖從亞細胞水平闡明一氧化碳在局灶性腦缺血中的作用機制.方法：將大鼠隨機分為腦含水量測定組、腦梗死灶測定組、血腦屏障檢測組、Na<'+>K<'+>ATP酶脂質(zhì)過氧化反應測定組,每一組中又隨機分為生理鹽水、血紅素氧合酶誘導劑氯化血紅素(Hemin)、血紅素氧合酶抑制劑鋅卟啉（ZnPP）三小組,分別給與生理鹽水、Hemin、ZnPP腹腔注射,12h后制成MCAO模型,栓塞后24h分別

3、測定血液一氧化碳濃度、腦含水量、腦梗死灶體積、血腦屏障通透性、Na<'+>-K<'+>ATP酶及脂質(zhì)過氧化反應各項指標.結論：局灶性腦缺血時內(nèi)源性一氧化碳具有腦保護作用,其具體機制不清,可能與Ca<'2+>內(nèi)流降低有關.第三部分,血紅素氧合酶-1及血紅素氧合酶-2在局灶性缺血腦組織中的免疫組化研究.目的：研究局灶性腦缺血時血紅素氧合酶-1（HO-1）及血紅素氧合酶-2（HO-2）在腦內(nèi)的表達及分布部位.方法：采用大鼠大腦中動脈栓塞（MC

4、AO）致腦缺血模型,對54只大鼠腦缺血后不同時間點（0.5h、1h、2h、6h、12h、24h、48h、72h、7d）進行HO-1、HO-2免疫組化及病理學研究,用正常大鼠及假手術大鼠（n各為6只）作對照,采用計算機圖像分析技術計算兩者表達的強弱.結論：腦缺血時腦內(nèi)HO-1、HO-2表達的不同和分布部位的不同,表明HO-1與HO-2在缺血時腦內(nèi)HO-1、HO-2表達的不同和分布部位的不同,表明HO-1與HO-2在缺血時對腦組織的保護機能

5、不同,HO-1對已損傷的神經(jīng)元起修復作用,而HO-2在于維護正常神經(jīng)元細胞的穩(wěn)定.第四部分,血紅素氧合酶-1mRNA在局灶性缺血腦組織中表達的時相變化.目的：觀察腦缺血后血紅素氧合酶（HO-1）基因轉(zhuǎn)錄水平的表達規(guī)律.方法：在MCAO局灶性腦缺血模型上,采用半定量RT-PCR技術觀察腦缺血后不同時相HO轉(zhuǎn)錄水平（HO-1mRNA）的變化,以<,β>-actin為內(nèi)參照,條帶采用GDS8000凝膠成像分析系統(tǒng)測定光密度值.結論：局灶性腦缺