β3整合素在骨轉移小細胞肺癌中的表達及意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景:在全世界范圍內肺癌已成為惡性腫瘤相關性死亡的主要原因,其發(fā)病率在許多國家呈逐年上升趨勢[1]。在晚期肺癌患者中,骨轉移是常見的轉移形式。研究表明,大于35%的晚期肺癌患者出現骨轉移,而在尸檢中高達50%的肺癌患者存在骨轉移[2]。骨轉移作為肺癌嚴重的并發(fā)癥之一,它可引起疼痛、病理性骨折、脊髓壓迫、高鈣血癥等癥狀[3]。目前臨床治療骨轉移還僅限于姑息性治療。因此,深入研究骨轉移的機制,探討新的預防和治療骨轉移的方法顯得尤為重要。

2、許多前期臨床試驗結果顯示,β3整合素的拮抗劑能夠阻止腫瘤在骨內生長和抑制乳腺癌細胞引起的骨質吸收[4-6],這就表明β3整合素可能成為抑制骨轉移的治療靶點。
  目的:盡管有實驗提示β3整合素在某些腫瘤骨轉移中發(fā)揮著很重要的作用,但是它在人小細胞肺癌骨轉移中的作用仍然未被揭示。本研究通過對具有高骨轉移特性的人小細胞肺癌細胞株SBC-5和無骨轉移特性的人小細胞肺癌細胞株SBC-3[7]進行比較,分析兩者之間β3整合素的差異性及其意義

3、,探討β3整合素在小細胞肺癌骨轉移中的作用及機制。
  方法:首先應用RT-PCR、Westernblotting和免疫熒光染色方法檢測兩株細胞株中β3整合素的表達情況。然后利用干擾技術,使高表達β3整合素的SBC-5細胞株中β3整合素基因沉默,進而應用MTT實驗、軟瓊脂形成實驗、細胞凋亡檢測、黏附實驗、遷移及侵襲實驗等探究β3整合素在高骨轉移細胞株中的作用。
  結果:(1)不同骨轉移特性的人小細胞肺癌細胞株中β3整合素的

4、表達:RT-PCR和Westernblotting結果顯示,SBC-5細胞株中β3整合素mRNA含量和蛋白的表達均高于SBC-3細胞株;免疫熒光結果顯示,SBC-5細胞株細胞膜表面出現大量綠色熒光,而SBC-3細胞株卻僅有少量綠色熒光。(2)β3整合素在腫瘤增殖和轉移中的作用:MTT實驗結果顯示,沉默β3整合素基因的SBC-5細胞株的增殖能力明顯低于對照組(P<0.01);克隆形成實驗結果顯示,沉默β3整合素基因的SBC-5細胞株形成的

5、克隆數明顯少于對照組(P<0.05);細胞凋亡實驗結果顯示,沉默β3整合素基因的SBC-5細胞株的凋亡率顯著高于對照組(P<0.001);黏附實驗結果顯示,隨著時間的延長,兩組細胞黏附的細胞數量增多,沉默β3整合素基因的SBC-5細胞株在每個觀察時間點上黏附細胞數均少于對照組;遷移實驗結果顯示,沉默β3整合素基因的SBC-5細胞株遷移細胞數少于對照組(P<0.001);侵襲實驗結果顯示,沉默β3整合素基因的SBC-5細胞株穿過Matri

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