NT-3基因修飾嗅鞘細(xì)胞移植促進(jìn)脊髓損傷再生的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:脊髓損傷是常見(jiàn)疾患,造成許多病人肢體功能的障礙。嗅鞘細(xì)胞(OEG)兼有雪旺氏細(xì)胞與星形膠質(zhì)細(xì)胞的雙重功能特點(diǎn),它能伴從PNS進(jìn)入CNS而不同于雪旺氏細(xì)胞僅局限于PNS中,克服雪旺氏細(xì)胞與成纖維細(xì)胞在脊髓移植中功能的不足;嗅鞘細(xì)胞能在損傷段為再生神經(jīng)纖維形成髓鞘,保護(hù)其不受局部抑制因子的影響;嗅鞘細(xì)胞尚可分泌多種神經(jīng)生長(zhǎng)因子。OEG移植治療脊髓損傷的具有良好的前景。但由于OEG本身表達(dá)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的水平較低,尚不能滿(mǎn)足軸突再生的需要

2、,實(shí)驗(yàn)中在損傷稍遠(yuǎn)處觀(guān)察到再生軸突的數(shù)量仍較少。NT-3是NTs家族眾多的成員中最有效的一種,其對(duì)軸突再生的促進(jìn)效果優(yōu)于NGF和BDNF。但由于外源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子不能通過(guò)血腦屏障,半衰期短,臨床應(yīng)用上尚缺乏安全有效的給藥途徑。本研究的目的是將攜帶NT-3基因的真核表達(dá)載體,通過(guò)非病毒轉(zhuǎn)染途徑轉(zhuǎn)入OEG中,再將轉(zhuǎn)染后OEG移植到脊髓損傷大鼠體內(nèi),以期促進(jìn)大鼠胸脊髓損傷的恢復(fù)。 方法:將我室自形構(gòu)建的質(zhì)粒pEGFP-NT3,應(yīng)用脂質(zhì)

3、體介導(dǎo)的方法將其導(dǎo)入體外培養(yǎng)的嗅鞘細(xì)胞,將其移植入急性脊髓損傷大鼠體內(nèi),連續(xù)觀(guān)察12周時(shí)間,與接受單純OEG、空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染OEG移植的脊髓損傷大鼠進(jìn)行比較。 結(jié)果:轉(zhuǎn)染后OEG體外可檢測(cè)到NT3mRNA的表達(dá)量的增加,細(xì)胞裂解液可檢測(cè)到NT-3蛋白的表達(dá),同時(shí),此上清對(duì)脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的存活與突起生長(zhǎng)具促進(jìn)作用。移植轉(zhuǎn)染后OEG能在體內(nèi)長(zhǎng)期存活,表達(dá)NT-3基因,并較對(duì)照組更能促進(jìn)脊髓損傷區(qū)軸突的再生和后肢功能的恢復(fù)。 結(jié)論

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