老年性白內(nèi)障晶體上皮細胞凋亡及其相關(guān)基因蛋白表達的研究.pdf_第1頁
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1、山東大學碩士學位論文老年性白內(nèi)障晶體上皮細胞凋亡及其相關(guān)基因蛋白表達的研究姓名:李元彬申請學位級別:碩士專業(yè):眼科學指導(dǎo)教師:陳薇2001.11.10山東大學碩士學位論文________l________●___l●_l__●目的:探討老年性白內(nèi)障與晶體上皮細胞凋亡的關(guān)系及細胞凋亡調(diào)控基因P。bcb2蛋白在老年性白內(nèi)障晶體上皮細胞中的表達。份法:1應(yīng)用透射鏡觀察10例老年性白內(nèi)障晶體上皮細胞的超微結(jié)構(gòu),并拍照,尋找凋亡小體,并與正常透明

2、晶體上皮細胞超微結(jié)構(gòu)進行比較。2應(yīng)用Tunel方法檢測老年性白內(nèi)障晶體上皮細胞凋亡的生化特性,凋亡細胞核呈棕黃色,計數(shù)凋亡細胞百分率。3瓊脂糖凝膠電泳:收集20例老年性白內(nèi)障晶體前囊皮,剪碎后離心,以等體積的苯酚/氯仿、苯酚/氯仿/異丙醇和氯仿各抽提1次,用乙醇沉淀DNA,用RNA酶去除RNA。再用瓊脂糖凝膠電泳及溴乙錠染色,紫外燈下拍照。4取30例老年性白內(nèi)障及10例正常透明晶體前囊皮蠟塊,切片,脫蠟,應(yīng)用免疫組織化學方法,DAB顯色

3、,計數(shù)其P。bcl2蛋白陽性細胞百分率。結(jié)果;1透射電鏡下觀察,老年性白內(nèi)障晶體上皮細胞中有凋亡細胞,發(fā)現(xiàn)了典型的凋亡小體,正常透明晶體上皮中未見凋亡細胞。2老年性自內(nèi)障晶體上皮細胞中凋亡細胞率為84~378%,正常透明晶體上皮中未見陽性細胞。3老年性白內(nèi)障組瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)梯狀圖譜,正常對照組無此梯帶。4B,蛋白在正常透明晶體上皮中無表達,而在老年白內(nèi)障組中表達率為169—191%。bel2蛋白在兩組中均無表達。廣—y一一結(jié)論:老年

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