TRAIL及其相關因子在高血壓大鼠視網膜毛細血管細胞中的表達.pdf

1、目的:觀察三種降壓藥物對SHR及WKY大鼠的血壓控制,視網膜毛細血管細胞的凋亡,TRAIL及其相關因子的表達情況等,探討TRAIL及其相關因子與自發(fā)性高血壓大鼠視網膜毛細血管細胞凋亡之間的關系。
　　 方法:將40只11周齡自發(fā)性高血壓雄性大鼠(SHR)隨機分為科素亞給藥組(30mg/kg清晨灌胃),絡活喜給藥組(6mg/kg清晨灌胃),雅思達給藥組(2mg/kg清晨灌胃),及對照組,另設10只11周齡Wistar-Kyoto大

2、鼠做正常對照組。實驗前及實驗開始后每四周測一次大鼠鼠尾動脈收縮壓。大鼠灌胃8周后,先予適當麻醉后通過鼠尾動脈采血法取動靜脈混合血2ml經離心后取上清液置于-20度冰箱中備用,再予過量麻醉處死動物,通過局部灌流固定后摘取大鼠眼球儲存在4％多聚甲醛中備用。應用標本時通過剝離視網膜,消化神經等組織,吹打去除多余成分等步驟制備視網膜毛細血管網鋪片。采用原位DNA末端酶標記技術(TUNEL)等檢測視網膜毛細血管細胞凋亡情況,采用免疫組化法檢測視網

3、膜毛細血管中TRAIL及DR4的表達情況,采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測血中S-TRAIL和S-DR4的濃度。
　　 結果:鼠尾動脈加壓測壓法發(fā)現(xiàn)與SHR對照組相比,SHR各給藥組血壓均顯著下降(P<0.01),各給藥組之間及與WKY正常對照組之間未見明顯差異(P>0.05):視網膜毛細血管網鋪片HE染色從形態(tài)學上可觀察到SHR對照組中出現(xiàn)大量毛細血管閉塞,毛細血管丟失,伴無細胞毛細血管形成,此現(xiàn)象在其他組中未見到；TUNEL

4、法檢測細胞凋亡發(fā)現(xiàn)與SHR對照組相比,各給藥組細胞凋亡率均顯著下降(P<0.01),各給藥組與WKY正常對照組相比均見明顯差異(P<0.05)；但各給藥組之間未見明顯差異(P>0.05)；免疫組織化學檢測視網膜毛細血管中TRAIL及DR4蛋白的表達發(fā)現(xiàn),SHR對照組中兩種蛋白的表達均顯著高于SHR各給藥組(P<0.01),SHR各給藥組與WRY正常對照組相比也有明顯差異(P<0.05),各給藥組間未見明顯差異(P>0.05)；ELISA

5、檢測到的血清中S-TRAIL濃度在SHR對照組與WKY組之間、各給藥組與SHR對照組之間及各給藥組與WRY組之間差異明顯(P<0.01、P<0.05、P<0.05),各給藥組之間未見明顯差異。而S-DR4僅在SHR對照組與WKY組及SHR-Los組之間有較顯著差異(P<0.05),其他各組間未見明顯差異。
　　 結論:3種不同機制的降壓藥物均能使血壓降至正常范圍,且三種藥物的降壓效果基本相同；TRAIL與其受體DR4可能參與了高