異氟烷對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶功能及海馬乙酰膽堿受體表達(dá)的影響.pdf

1、一、研究背景
　　 術(shù)后認(rèn)知功能障礙是術(shù)后常見(jiàn)的并發(fā)癥,主要表現(xiàn)為幻視、幻聽(tīng)、情緒狀態(tài)的改變和學(xué)習(xí)記憶功能的下降。目前認(rèn)為術(shù)后認(rèn)知功能障礙的潛在原因和危險(xiǎn)因素非常繁雜,普遍認(rèn)為:心肺轉(zhuǎn)流、全麻藥、低氧血癥、高齡、麻醉時(shí)間長(zhǎng)、教育水平低、高脂血癥和低血壓等是術(shù)后認(rèn)知功能障礙的危險(xiǎn)因素。其中比較公認(rèn)的因素是年齡,高齡患者的發(fā)生率也明顯高于其他患者。但其確切發(fā)病機(jī)制目前不是十分清楚。
　　 異氟烷是全身麻醉的主要用藥之一,在臨

2、床工作中廣泛使用。異氟烷可以對(duì)血壓、腦血流、腦代謝等有影響甚至直接作用神經(jīng)的電傳導(dǎo)和物質(zhì)代謝。研究發(fā)現(xiàn)異氟烷能夠?qū)е滦g(shù)后認(rèn)知功能障礙的明顯發(fā)生,并認(rèn)為是其發(fā)病的重要原因之一
　　 中樞煙堿型乙酰膽堿受體(nAChR)在認(rèn)知活動(dòng)中有十分重要的作用。在MCI(mildcognitive impairment MCI是指介于正常老化和癡呆之間的一種認(rèn)知缺損狀態(tài),主要表現(xiàn)在記憶減退與年齡的不相稱(chēng),但沒(méi)有達(dá)到AD的標(biāo)準(zhǔn))和Alzheime

3、r病(AD)研究發(fā)現(xiàn)患者的腦內(nèi)特定區(qū)域發(fā)現(xiàn)的nAChR減少。
　　 二、目的和方法
　　 綜上所述,我們推測(cè)吸入異氟烷對(duì)不同年齡大鼠學(xué)習(xí)記憶有影響,并可能導(dǎo)致的其海馬nAChR的改變。所以我們選擇成年和老年大鼠,設(shè)立吸入異氟烷組和對(duì)照組,通過(guò)行為學(xué)、形態(tài)學(xué)和分子表達(dá)來(lái)檢測(cè)吸入異氟烷前后大鼠的變化來(lái)為術(shù)后認(rèn)知功能障礙的機(jī)制研究提供一條思路。
　　 三、結(jié)果
　　 1.吸入動(dòng)物模型的建立和穩(wěn)定性檢測(cè)
　

4、　 將大鼠放入自制麻醉箱[8]中,調(diào)節(jié)好新鮮氣體流量和揮發(fā)罐濃度,并監(jiān)測(cè)異氟烷濃度,保持吸入異氟烷在1.2％并維持5h。在持續(xù)吸入1.2％異氟烷過(guò)程中監(jiān)測(cè)氧飽和度及檢測(cè)動(dòng)脈血氧分壓(吸入1.2％異氟烷30min、60min、120min、180min、300min),并與對(duì)照組比較。發(fā)現(xiàn)兩組氧飽和度與動(dòng)脈血氧分壓并無(wú)差異。
　　 2.Morris水迷宮行為訓(xùn)練和測(cè)試
　　 老年大鼠異氟烷處理后與其余組相比潛伏期第3d、

5、4d、5d明顯延長(zhǎng);平臺(tái)象限游泳距離比只是在第3d、4d有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;其余組間無(wú)統(tǒng)計(jì)改變。在較長(zhǎng)時(shí)間的第7d、14d、28d平臺(tái)穿越次數(shù)無(wú)明顯差異。
　　 3.海馬乙酰膽堿受體陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)
　　 大鼠斷頭取腦,進(jìn)行石蠟包埋,在視交叉前端大腦和背側(cè)海馬處連續(xù)切片,進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。以Fromowitz半定量法檢測(cè)結(jié)果顯示:老年大鼠異氟烷處理后1天的海馬α4nAChR的陽(yáng)性表達(dá)明顯減少。
　　 4.海馬乙酰膽堿