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文檔簡介
1、 目的:探討槲皮素對ApoE-/-小鼠動脈粥樣硬化(arteriosclerosis,AS)形成及SDF-1/CXCR4表達的影響作用。 方法:1、實驗動物分組:40只6周齡的ApoE-/-小鼠正常喂養(yǎng)一周后隨機分為四組(N=10只):模型對照組(高脂飲食);槲皮素低劑量組(高脂飲食+槲皮素50 mg/kg/d);槲皮素中劑量組(高脂飲食+槲皮素100 mg/kg/d)、槲皮素高劑量組(高脂飲食+槲皮素150 mg/kg/d),同時選
2、取相同遺傳背景的6周齡正常C57BL/6J雄性小鼠10只作為正常對照組(普通飲食)。各組分別于給藥后第10周和第20周,隨機處死5只小鼠并取材。2、取小鼠眼眶血,用ELISA法檢測血清中SDF-1和CXCR4的水平;取小鼠主動脈弓,HE染色觀察動脈粥樣硬化病變;免疫組織化學技術及Real-time PCR檢測SDF-1和CXCR4在主動脈上的表達情況。結果:1、HE染色結果:正常對照組:10周和20周的結果均示內膜無增生,內彈力膜完整無
3、腫脹,內皮細胞形態(tài)正常。模型對照組:10周時,內膜增厚,可見平滑肌細胞增殖以及大量泡沫細胞形成,并形成纖維斑塊。20周時內彈力膜斷裂,粥樣斑塊形成;槲皮素組:10周時,高劑量組和中劑量組動脈管壁均無明顯病變,低劑量組可見泡沫細胞形成;20周時,高劑量組和中劑量組內皮細胞缺失,偶見平滑肌細胞遷移至內膜,少量泡沫細胞形成;低劑量組可見粥樣斑塊形成,但面積較模型對照組小。2、免疫組化結果分析:相同時間點比較,正常對照組:SDF-1主要表達于內
4、皮細胞和平滑肌細胞,CXCR4主要表達于內皮細胞,但細胞著色淺,表達量少;模型對照組:平滑肌細胞以及泡沫細胞呈深棕黃色,顯示SDF-1和CXCR4有大量表達;槲皮素組:高中低劑量的三個實驗組與模型對照組比較,細胞著色較淺,表達量均有減少(P<0.05);與正常對照組比較,低劑量組、中劑量組有統計學差異(P<0.05)。不同時間點比較, SDF-1在模型對照組的表達量隨時間延長而增加(P<0.05);(3)ELISA檢測血清中SDF-1和
5、CXCR4水平,Real-time PCR檢測SDF-1和CXCR4的mRNA基因表達結果:在相同時間點比較,SDF-1及CXCR4在模型對照組中表達最高,正常對照組表達最低,槲皮素組介于兩者之間,且隨著藥物劑量的增加SDF-1和CXCR4表達量進行性下降,尤其是CXCR4在高劑量組與正常對照組比較無統計學差異(P>0.05);不同時間點相同組比較,模型對照組的SDF-1和CXCR4均隨時間延長而增加(P<0.05),槲皮素組和正常對照
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