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文檔簡介
1、目的:研究從植物紅楠中提取的木脂素對MCF-7乳腺癌細(xì)胞的抗增殖作用,并初步探討其作用機制。
方法:實驗分為對照組和實驗組,對照組:不加木脂素的MCF-7乳腺癌細(xì)胞;實驗組:加不同濃度木脂素的MCF-7乳腺癌細(xì)胞,每組細(xì)胞分別培養(yǎng)24、48和72 h。倒置顯微鏡觀察MCF-7乳腺癌細(xì)胞生長情況,應(yīng)用MTT方法檢測對照組和實驗組各時間段的細(xì)胞生存率,并采用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測Bax、Bcl-2、p21、p27及c-myc蛋白的表
2、達,流式細(xì)胞技術(shù)檢測實驗組與對照組細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡率。
結(jié)果:(1)形態(tài)學(xué)觀察:倒置顯微鏡觀察,對照組MCF-7乳腺癌細(xì)胞增殖能力隨培養(yǎng)時間的延長明顯增強,而用木脂素處理的實驗組MCF-7乳腺癌細(xì)胞增殖明顯受抑制,細(xì)胞凋亡數(shù)明顯增高。
(2)MTT檢測結(jié)果表明,實驗組 MCF-7乳腺癌細(xì)胞生存率明顯降低,具有濃度和時間依賴性,與對照組相比均有顯著性差異。
(3)免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果,在24、48和72h時
3、對照組乳腺癌細(xì)胞Bcl-2、c-myc蛋白的表達呈強陽性,Bax、p21及p27蛋白的表達呈弱陽性,而實驗組24、48和72h時乳腺癌細(xì)胞Bcl-2、c-myc蛋白的表達呈弱陽性,Bax、p21及 p27蛋白的表達呈強陽性,與對照組相比均有顯著性差異。
(4)利用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期結(jié)果,對照組MCF-7乳腺癌細(xì)胞凋亡率為0.01%,實驗組MCF-7乳腺癌細(xì)胞凋亡率在48和72h時分別為23.55%和29.03%
4、,與對照組相比均有顯著性差異。細(xì)胞周期檢測結(jié)果,G1期、G2期、S期細(xì)胞百分比對照組為55.6%、16.17%和28.23%;實驗組48 h和72 h時分別為66.63%、9.67%和23.69%:64.25、11.13和24.62%。
結(jié)論:木脂素對MCF-7乳腺癌細(xì)胞具有明顯的抗增殖作用,其機制之一是通過上調(diào)Bax蛋白,下調(diào)Bcl-2蛋白的表達,從而促進細(xì)胞凋亡;同時通過增強p21及p27蛋白的表達,抑制c-Myc蛋白的表
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