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文檔簡介
1、目的:①探討內(nèi)臟脂肪素是否能調節(jié)內(nèi)皮細胞MCP—1和IL—6生成以及信號轉導機制。②評價血漿內(nèi)臟脂肪素與炎癥、動脈粥樣硬化以及急性冠脈綜合征(ACS)之間的聯(lián)系。 方法:⑴培養(yǎng)3—5代臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC),給予不同劑量和不同干預時間的內(nèi)臟脂肪素刺激HUVEC。內(nèi)臟脂肪素刺激基礎上給予不同蛋白激酶抑制劑:渥曼青霉素(磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制劑)、SB203580(p38絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制劑)、PD98
2、059(細胞外信號調節(jié)激酶(ERK)抑制劑)、JNK inhibitorⅡ(c—Jun氨基末端激酶(JNK)抑制劑)和HNMPA—(AM)3(胰島素受體酪氨酸激酶抑制劑),ELISA測定培養(yǎng)液MCP—1和IL—6濃度,實時定量聚合酶鏈反應(RT-PCR)測定細胞MCP—1和IL—6 mRNA表達。⑵253例臨床懷疑冠心病的患者均行冠狀動脈造影,分為三組:穩(wěn)定性心絞痛(SAP)(102例)、ACS(100例)和無冠心病對照組(51例)。測
3、定循環(huán)血中內(nèi)臟脂肪素、單核細胞趨化蛋白—1(MCP—1)、白介素—6(IL—6)、高敏C反應蛋白(hs—CRP)等細胞因子,探討內(nèi)臟脂肪素和傳統(tǒng)危險因素、炎癥、動脈粥樣硬化以及急性冠脈綜合征之間的聯(lián)系。 結果:①內(nèi)臟脂肪素刺激HUVEC合成MCP—1和IL—6,呈劑量和時間依賴性,內(nèi)臟脂肪素濃度為500ng/mL或作用時間48小時后MCP—1和IL—6表達達到高峰;渥曼青霉素、SB203580、PD98059等蛋白激酶抑制劑能阻
4、斷內(nèi)臟脂肪素誘導的MCP—1、IL—6合成,并抑制MCP—1、IL—6 mRNA表達。胰島素受體抑制劑HNMPA—(AM)3預處理HUVEC,阻斷內(nèi)臟脂肪素誘導的MCP和IL—6蛋白和基因表達。②SAP和ACS患者血漿內(nèi)臟脂肪素水平較無冠心病對照組患者明顯升高(分別為12.0(9.7,15.5)12.0 ng/mL,13.4(11.1,15.9)ng/mL,10.2(8.7,12.8)ng/mL,p<0.05)。亞組分析表明冠心病患者是
5、否合并糖尿病、高脂血癥、肥胖癥血漿內(nèi)臟脂肪素水平無顯著性差異。多元線性回歸分析表明內(nèi)臟脂肪素與IL—6、MCP—1、空腹血糖(FPG)正相關,β值分別為0.0029、0.337和0.104。多因素logistic回歸分析調整傳統(tǒng)危險因素和炎癥性因素后顯示血漿內(nèi)臟脂肪素水平與SAP和ACS密切相關。血漿內(nèi)臟脂肪素水平位于第2、3、4四分位數(shù)區(qū)間的人群SAP危險比數(shù)比(OR)分別為1.74(0.96,2.69)、1.54(0.85,2.28
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