清熱養(yǎng)陰方抑制胃癌細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　目的：通過(guò)清熱養(yǎng)陰方穩(wěn)定劑型作用于胃癌細(xì)胞,進(jìn)行對(duì)胃癌細(xì)胞抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的實(shí)驗(yàn)研究,探尋該方藥的作用機(jī)制,以期初步為清熱滋陰法在胃癌治療中的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和依據(jù)。
　　方法：將基于清熱滋陰理論組方的中藥進(jìn)行水提醇沉法工藝制備,制成穩(wěn)定劑型；體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞株 SGC-7901、MGC-803,通過(guò) MTT比色法應(yīng)用清熱養(yǎng)陰方對(duì)胃癌細(xì)胞株進(jìn)行藥物敏感性檢測(cè),根據(jù) 24h 預(yù)實(shí)驗(yàn)得出半數(shù)抑制濃度IC50確定中藥高、中

2、、低劑量,將實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為六組,即中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組、順鉑組、對(duì)照組與空白組,在倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)與細(xì)胞活性,應(yīng)用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)定細(xì)胞吸光度 OD 值,得出細(xì)胞抑制率。采用免疫組化之鏈霉素抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶法檢測(cè) nm23 和 bcl-2 在胃癌細(xì)胞各組的表達(dá)情況,計(jì)算細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)例數(shù)。
　　結(jié)果：⑴MTT 實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05；中藥對(duì)胃癌細(xì)胞株 SGC-79

3、01、MGC-803 均有細(xì)胞毒作用；中藥劑量高低與胃癌細(xì)胞細(xì)胞凋亡正相關(guān),與時(shí)間長(zhǎng)短正相關(guān),即中藥高劑量組對(duì)胃癌細(xì)胞抑制增殖作用最強(qiáng),中藥作用時(shí)間越長(zhǎng)其抑制作用越強(qiáng)；中藥中劑量組與順鉑組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05；中藥高劑量組與順鉑組無(wú)顯著差異, P>0.05。⑵免疫組化實(shí)驗(yàn)中, Nm23 對(duì)胃癌細(xì)胞 SGC-7901、MGC-803 在清熱養(yǎng)陰方高、中劑量組和順鉑 10ug/mL 組的表達(dá)與空白組差異顯著,P<0.05；在對(duì)照組

4、的表達(dá)與空白組無(wú)顯著差異,P>0.05。Bcl-2對(duì)胃癌細(xì)胞 SGC-7901、MGC-803 在對(duì)照組的表達(dá)與空白組有差異, P<0.05。其中 nm23 在清熱養(yǎng)陰方的藥物影響下陽(yáng)性表達(dá)率較高,均高于對(duì)照組；而 bcl-2 在清熱養(yǎng)陰方藥物干預(yù)作用下陽(yáng)性表達(dá)率較低,且均低于對(duì)照組。
　　結(jié)論：水提醇沉法工藝制備中藥穩(wěn)定劑型,清熱養(yǎng)陰方中藥與胃癌細(xì)胞凋亡密切相關(guān),中藥對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)增殖具有抑制作用,抑制作用與給藥濃度成正比。中