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1、實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(EAE)是由神經(jīng)髓鞘抗原誘導(dǎo)、CD4<'+>T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的自身免疫性疾病,以CNS脫髓鞘及血腦屏障(BBB)破壞為病理特征,且病變有自發(fā)緩解過(guò)程,是人類(lèi)多發(fā)性硬化(MS)理想的動(dòng)物模型.該實(shí)驗(yàn)探討在EAE非敏感品系Wistar大鼠不同部位加用百日咳桿菌誘導(dǎo)EAE模型以及EAE時(shí)腦、脊髓細(xì)胞凋亡的情況,以及地塞米松、雷公藤對(duì)細(xì)胞凋亡的影響,以求進(jìn)一步揭示EAE發(fā)病機(jī)理,為治療提供理論依據(jù)
2、和新的治療選擇.實(shí)驗(yàn)分兩部分:第一部分:制備EAE模型,應(yīng)用豚鼠腦脊髓勻漿與完全弗氏佐劑(CFA)皮下注射及減毒百日咳桿菌足背皮內(nèi)注射成功誘導(dǎo)了Wistar大鼠高發(fā)病率(87.5%,n=24)EAE模型.第二部分:在體實(shí)驗(yàn),檢測(cè)免疫后(p.i.),NS組、CFA組、EAE組、DXM組、TP組腦、脊髓細(xì)胞凋亡的情況.結(jié)果如下:1.足背皮下或皮內(nèi)注射減毒百日咳桿菌,EAE發(fā)病率(87.5%)明顯高于減毒百日咳桿菌腹腔注射組(35.7%);發(fā)
3、病時(shí)間為10.25±1.67d p.i.,早于腹腔組的14.8±1.79 d p.i.;病情嚴(yán)重程度,足背組臨床評(píng)分平均為3.38±0.74,腹腔組為2.4±0.55,差異均有顯著性.腹腔組病灶數(shù)量較足背組明顯少.2.EAE、DXM、TP三組的發(fā)病率、臨床評(píng)分、體重變化無(wú)顯著性差異;死亡率EAE組較高,與DXM、TP組相比差異有顯著性;DXM與TP組相比差異無(wú)顯著性.3.用TUNEL方法測(cè)腦、脊髓細(xì)胞凋亡率,NS組、EAE組細(xì)胞凋亡率幾
4、乎測(cè)不出,兩者差異無(wú)顯著性,與CFA、DXM、TP組差異有顯著性.CFA組細(xì)胞凋亡率較NS、EAE組高,差異有顯著性;較DXM、TP組低,差異有顯著性.DXM、TP組細(xì)胞凋亡率最高,但兩組無(wú)顯著性差異.結(jié)論:1.百日咳對(duì)EAE非敏感品系Wistar大鼠誘導(dǎo)EAE模型有重要作用,不同的注射部位對(duì)發(fā)病率有明顯的影響.足背皮下或皮內(nèi)注射減毒百日咳桿菌誘導(dǎo)EAE模型,病程、病變、臨床表現(xiàn)均典型,發(fā)病率高,經(jīng)濟(jì)易行,適合在國(guó)內(nèi)開(kāi)展.2.EAE發(fā)病
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