重組腺病毒介導的NDRG2基因?qū)θ思谞钕侔┘毎捏w外殺傷作用及機制.pdf_第1頁
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1、3(1405e68業(yè)代目100602陜西中醫(yī)學院Shaan村UnivcrsitvofChineseMedicine碩士學位論文重紀腺病毒介導的ND要G2基因?qū)萌麗面瓣砑嗓麗研£夏萬麗學位申請人專業(yè)名稱申請學位類型指導教師姓名論文提交日期付強中西醫(yī)結(jié)臺臨床(外科)臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位王建華教授2008年4月癌的診斷和治療也具有一定的重要意義。本實驗重點討論DNRG2過表達之后對甲狀腺腫瘤細胞的影響。目的:重組腺病毒介導的NDRG2基因A

2、d—NDRG2對甲狀腺癌細胞株FTC一133的體外殺傷作用及機制。方法:應用體外轉(zhuǎn)染Ad—NDRG2于甲狀腺癌FTC一133細胞,48h后應用倒置顯微鏡觀察腺病毒AdNDRG2轉(zhuǎn)染細胞后形態(tài)的變化;應用RTPCR、Westernblot檢測Ad—NDRG2在FTC133細胞中的轉(zhuǎn)錄及表達;通過細胞計數(shù)、MTT實驗,觀察AdNDRG2對FTC133細胞生長抑制作用;應用流式細胞分析儀(FCM)檢測AdNDRG2對FTC133細胞凋亡率的變

3、化;應用透射電鏡觀察外源性NDRG2對FTC133細胞超微結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果:發(fā)現(xiàn)經(jīng)Ad—NDRG2轉(zhuǎn)染FTC一133細胞后48h,可見部分細胞由貼壁脫落而呈懸浮生長,貼壁能力減弱,細胞形態(tài)變圓,體積縮小,折光性增強,而AdLacZ組及PBS組細胞正常生長;AdNDRG2轉(zhuǎn)染FTC133細胞后應用RTPCR檢測到NDRG2mRNA的表達,F(xiàn)TC一133細胞經(jīng)AdNDRG2轉(zhuǎn)染后能夠表達特異性NDRG2蛋白,大小約44kDa;經(jīng)AdNDRG

4、2轉(zhuǎn)染后不同時間,其細胞生長速度明顯低于AdLacZ轉(zhuǎn)染組及PBS組的細胞;MTT實驗證實,外源性’NDRG2基因轉(zhuǎn)染顯著抑制了FTC133細胞的增殖,并隨著時間的延長其抑制率增強,而AdLacZ轉(zhuǎn)染組則無明顯的抑制作用;轉(zhuǎn)染AdNDRG2后的FTC133細胞經(jīng)FCM檢測,細胞凋亡率明顯升高;透射電鏡下可見轉(zhuǎn)染NDRG2基因組細胞則呈典型凋亡征象,細胞膜完整,核染色質(zhì)邊集。結(jié)論:我們得出的結(jié)論是Ad—NDRG2對甲狀腺癌細胞株FTC13

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