AMPA受體GluR1、GluR3亞基膜運輸在丙泊酚后處理長程腦保護作用中的研究.pdf

1、目的：隨著人口老齡化以及腦血管病發(fā)生年輕化趨勢的加劇，缺血性腦血管病的發(fā)病率逐年升高，且圍手術期的相關診治措施亦可增加腦缺血的發(fā)生風險。因此對于術前已存在腦缺血或術中可能發(fā)生腦缺血的高危人群，圍術期麻醉藥物的選擇是麻醉醫(yī)師需要慎重思考的問題。丙泊酚是目前最為常用的靜脈麻醉藥，能夠降低腦氧代謝率、顱內壓，且具有抗氧化和抑制細胞凋亡的作用，從而能夠減輕腦缺血再灌注損傷。本項目組前期研究顯示，丙泊酚后處理對腦缺血再灌注損傷具有保護作用，且作用

2、機制可能與穩(wěn)定腦缺血過程中突觸后膜α-氨基-3-羥基-5-甲基-4-異噁唑丙酸(AMPA)受體谷氨酸受體(GluR)2亞基的表達有關。本研究旨在觀察丙泊酚后處理是否對腦缺血再灌注損傷具有長時程延遲性保護作用，并進一步探討AMPA受體GluR1、GluR3亞基是否參與其中，從而為臨床上腦缺血及其高危人群麻醉藥物的合理選擇提供理論依據。
　　方法：健康成年SD雄性大鼠176只，體重250～280g，隨機分為4組(n=44)：假手術組(

3、Sham組，再灌注即刻經靜脈輸注與丙泊酚等體積的生理鹽水2h)、局灶性腦缺血再灌注組(I/R組，再灌注即刻經靜脈輸注等體積生理鹽水2h)、內酯對照組(Intra組，再灌注即刻經靜脈輸注等體積英脫利匹特2h)、丙泊酚組(Pro組，再灌注即刻經靜脈輸注丙泊酚20mg·kg-1·h-1，維持2h)，采用線栓法建立大鼠局灶性腦缺血模型，栓塞大鼠右側大腦中動脈60min后施行再灌注。術中維持大鼠呼吸、循環(huán)及體溫平穩(wěn)，缺血后第1、3、7、14、21

4、、28天采用Garcia評分標準(18分制)對各組大鼠進行神經行為學功能評分，缺血后第1、7、14、28天采用TTC染色法檢測腦組織梗死灶體積變化，缺血后第9、23天開始分別進行兩周期的Morris水迷宮實驗檢測大鼠認知功能的改變，并于缺血后第1、14、28天留取標本采用Westernblot法檢測AMPA受體GluR1、GluR3亞基缺血側海馬總蛋白和膜蛋白的表達，缺血后第28天留取標本采用免疫熒光雙標法檢測缺血損傷后同側海馬齒狀回神

5、經干細胞的增殖和分化情況。
　　結果：與Sham組比較，I/R組、Pro組大鼠神經功能評分下降，腦梗死體積增加，逃避潛伏期明顯延長，跨越平臺次數減少(P<0.01)，目標象限游泳時間比和目標象限游泳距離比減小(P<0.05)，缺血側海馬組織GluR1、GluR3亞基總蛋白表達差異無統計學意義(P>0.05)，GluR1在膜表面表達在缺血后第1、14天明顯上調(P<0.05)，GluR3在膜表面表達在缺血后第1天明顯上調，BrdU+

6、NeuN雙標陽性細胞數增加；與I/R相比，Pro組大鼠神經功能評分改善，腦梗死體積縮小，跨越平臺次數增加(P<0.05)，逃避潛伏期縮短(P<0.05)，目標象限游泳時間比和目標象限游泳距離比增加(P<0.05)，缺血側海馬組織GluR1、GluR3總蛋白表達無明顯變化(P>0.05)，而GluR1在膜表面的表達在1天、14天明顯減少(P<0.05)，GluR3在膜表面的表達在1天明顯減少(P<0.05)，BrdU+NeuN雙標陽性細胞