堿性成纖維細胞生長因子對犬角膜上皮細胞增殖影響的研究.pdf

1、本文制作了角膜上皮細胞，采用DMEM/F-12培養(yǎng)液培養(yǎng)，將培養(yǎng)到第三代的角膜上皮細胞用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法觀察堿性成纖維細胞生長因子在不同濃度(0ng/mL，1ng/mL，10ng/mL，100ng/mL)和不同時間點(24h，48h，96h)對犬角膜上皮細胞培養(yǎng)增殖性能來研究堿性成纖維細胞生長因子對犬角膜上皮細胞的生長和增殖的影響，檢測所的的結果表示為光密度值(OD)值，OD值的大小與細胞密度呈正比。結果表明，從1ng/m

2、L開始，隨濃度遞增，OD值逐漸上升，10ng/mL時達到峰值，此后隨濃度遞增OD值下降。bFGF組從lng/mL開始各濃度組OD值均大于對照組(P<0.05)，說明bFGF對犬角膜上皮細胞有明顯的促分裂作用。10ng/mL組在24h、48h、96h均高于其他劑量組。說明堿性成纖維細胞生長因子有明顯促進犬角膜上皮細胞增殖的作用，在一定范圍內呈劑量依賴性，10ng/mL為促進犬角膜上皮生長的最佳劑量。 此外，建立了犬角膜環(huán)鉆損傷模型

3、，分析堿性成纖維細胞生長因子對犬角膜損傷的治療效果。將24只雜交犬隨機分成四組：生理鹽水對照組、0.1μg/mL bFGF組、0.5μg/mLbFGF組、1μg/mLbFGF組。每組使用不同濃度的bFGF點眼，每日三次，每次兩滴。并在術后第1d、第3d、第5d、第7d同一時間用熒光染色素鈉染液點眼，照相觀察角膜上皮愈合效果。并于術后第3d、第7d、第14d取角膜各5只制作病理切片觀察角膜上皮愈合情況及膠原纖維排列情況、成纖維細胞生長情況

4、。熒光染色結果表明，環(huán)鉆損傷后第1 d，0.5μg/mL劑量組愈合率為27.47％，1μg/mL劑量組愈合率為312.3％，與對照組相比差異極顯著(P<0.01)。環(huán)鉆損傷后第3d、第5d不同濃度的bFGF各組愈合率均極顯著高于對照組(P<0.01)，第7d時除對照組有兩例愈合不良外各組均基本愈合。顯示堿性成纖維細胞生長因子能促進犬角膜損傷后角膜上皮愈合，早期應用即能發(fā)揮作用。病理切片觀察發(fā)現(xiàn)添加堿性成纖維細胞生長因子的犬角膜上皮修復快