MCP多糖的制備、分析及其抗腫瘤活性的研究.pdf

1、在糖生物學(xué)發(fā)展的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了許多新藥靶點(diǎn),半乳糖凝集素-3(Gal-3)便是該領(lǐng)域的重要抗癌藥物靶點(diǎn)。通過(guò)化學(xué)手段能獲得改性的多糖,這些新型多糖可以作為藥物開(kāi)發(fā)的先導(dǎo)分子。改性柑橘果膠(MCP)是一種以Gal-3為靶的,具有抗腫瘤生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移和腫瘤血管生成作用的可溶性多糖。與化學(xué)合成的Gal-3抑制劑相比較,MCP具有制備易、成本低、無(wú)毒性和給藥方便等優(yōu)勢(shì),開(kāi)發(fā)前景良好。
　　 MCP通過(guò)皂化、酸解兩步制備,然后以乙醇沉淀法

2、提純,整個(gè)工藝收率很高。影響MCP收率的重要因素是皂化過(guò)程。通過(guò)對(duì)MCP制備過(guò)程進(jìn)行分析,認(rèn)為與皂化過(guò)程同時(shí)發(fā)生的β-消除反應(yīng)是降解柑橘果膠的主要步驟。升高酸解過(guò)程的溫度能夠降低MCP分子量。不論是酸還是堿,都能夠改變MCP的糖組分,改造MCP的水解工藝應(yīng)該兼顧分子量與糖組分的變化。
　　 本研究首次對(duì)MCP進(jìn)行了均一度、化學(xué)特征、分子量和分子量分布及一級(jí)結(jié)構(gòu)初步分析。瓊脂糖凝膠電泳、比旋度測(cè)試和HPLC實(shí)驗(yàn)證明,MCP是單一組

3、分。通過(guò)優(yōu)化間羥基聯(lián)苯法,測(cè)定的MCP糖醛酸含量為81.0％(MCP-1)和84.1％(MCP-2)。甲氧基含量為:0.15％(MCP-1)和0.92％(MCP-2)。MCP相對(duì)分子量依次為:Mp為46 kD;Mw為43 kD;Mn為20～22 kD;Mz為66 kD;多分散性指數(shù)為2。UV和IR測(cè)試均沒(méi)有發(fā)現(xiàn)糖以外的結(jié)構(gòu)特征,兩者均發(fā)現(xiàn),MCP殘存β消除產(chǎn)物的特征。對(duì)MCP進(jìn)行高碘酸氧化,證明MCP含有(1→3)和(1→6)糖苷鍵,表

4、明MCP含有少量分支結(jié)構(gòu)。通過(guò)對(duì)部分酸水解的MCP進(jìn)行13C-NMR分析,表明MCP主干含有同聚半乳糖醛酸與鼠李糖半乳糖醛酸。
　　 選用三種小鼠移植性腫瘤模型,對(duì)MCP的抗腫瘤生長(zhǎng)活性進(jìn)行了初步研究。結(jié)果表明,MCP-1對(duì)肝癌H22細(xì)胞有較強(qiáng)的抑制作用,高劑量下抑制率達(dá)到47.8％;對(duì)宮頸癌U14細(xì)胞的抑制率在高劑量與中劑量下分別達(dá)到36.5％和38.5％;對(duì)于肉瘤S180細(xì)胞無(wú)抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用。這些結(jié)果表明,MCP-1對(duì)腫