人參皂苷通過Nrf2-ARE通路對POFS大鼠骨髓肌氧化應(yīng)激損傷的影響.pdf

1、目的:研究人參皂苷Rb1通過激活Nrf2/ARE通路從而達(dá)到減輕術(shù)后疲勞綜合征(POFS)老年大鼠骨骼肌氧化應(yīng)激損傷，并進(jìn)一步深入探討人參皂苷Rb1所具有的抗疲勞機(jī)制。
　　方法:采用制作70％中段小腸切除外加端端吻合術(shù)法來作為術(shù)后疲勞綜合征大鼠模型，首先通過體重測試篩選出96只重量相近的SPF級老年雄性Sprague-Dawley大鼠，再隨機(jī)分為對照組，模型組和人參皂苷Rb1干預(yù)組(GRb1組)三組。每組再按不同時(shí)間點(diǎn)分為術(shù)后第

2、6小時(shí)、術(shù)后第1天、術(shù)后第3天、術(shù)后第7天4小組，共12小組，每小組8只。GRb1組分別于手術(shù)前1小時(shí)及術(shù)后每天腹腔注射15mg·kg-1體重的人參皂苷Rb1。作為對照，對照組和模型組則在相同條件下腹腔注射同體積的生理鹽水。然后每組分別在術(shù)后第6小時(shí)、第1、3、7天進(jìn)行曠場實(shí)驗(yàn)并檢測其行為學(xué)變化，之后分光光度法測定其骨骼肌內(nèi)丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;用RT-PCR法測定大鼠骨骼肌內(nèi)Nrf2 mRNA以及其下游Ⅱ

3、相解毒酶基因Nqo1 mRNA表達(dá);用Western blotting法測定大鼠骨骼肌核內(nèi)Nrf2蛋白轉(zhuǎn)位水平及Nrf2總蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:曠場實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，相比于對照組，模型組大鼠在術(shù)后一定時(shí)間點(diǎn)內(nèi)穿越格子數(shù)明顯減少（d1，d3，P＜0.05)，休息時(shí)間明顯延長（d1，d3，d7，P＜0.05）;相比于模型組，人參皂苷Rb1干預(yù)組大鼠穿越格子數(shù)在術(shù)后一定時(shí)間點(diǎn)內(nèi)明顯增加（d1，d3，P＜0.05)。相比于與對照組，模型

4、組大鼠骨骼肌SOD活性在術(shù)后一定時(shí)間點(diǎn)內(nèi)明顯增加(d3，d7，P＜0.05)，MDA含量明顯升高(d1，d3，d7，P＜0.05);相比于與模型組，人參皂苷Rb1干預(yù)組大鼠骨骼肌SOD活性在術(shù)后一定時(shí)間點(diǎn)內(nèi)明顯增加(d3，d7，P＜0.05)，MDA含量明顯降低(d3，d7，P＜0.05)。而RT-PCR檢測結(jié)果顯示，相比于與對照組，模型組骨骼肌Nrf2 mRNA表達(dá)在術(shù)后一定時(shí)間點(diǎn)內(nèi)明顯升高(d1，d3，P＜0.05)，Nqo1 mR

5、NA表達(dá)雖有上升趨勢，但并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（d1，d3，P＞0.05）;而相比于與模型組，人參皂苷Rb1干預(yù)組Nrf2 mRNA表達(dá)在術(shù)后一定時(shí)間點(diǎn)內(nèi)明顯升高(6h，d1，d3，P＜0.05)，Nqo1 mRNA表達(dá)亦明顯升高(6h，d1，P＜0.05)。Western blotting檢測結(jié)果顯示，相比于與對照組，模型組大鼠骨骼肌核內(nèi)Nrf2蛋白表達(dá)在術(shù)后一定時(shí)間點(diǎn)內(nèi)明顯升高(6h，d1，d3，d7，P＜0.05)，總Nrf2蛋白表達(dá)略有