甘藍型油菜PolCMS恢復系小孢子培養(yǎng)后代的遺傳變異.pdf

1、本文以甘藍型油菜為實驗材料進行小孢子培養(yǎng)，對小孢子培養(yǎng)過程中影響小孢子胚胎發(fā)生和植株再生的因素進行了進一步探討和改進，并利用小孢子培養(yǎng)技術構建了兩個恢復系的DH群體。利用AFLP技術對該DH群體進行了遺傳多樣性分析，分析了經小孢子培養(yǎng)獲得的DH群體的遺傳變異情況。同時，對獲得的兩個DH群體在田間和室內進行了農藝、經濟和品質性狀的考察，并對這些性狀進行了遺傳變異分析。主要研究結果如下： 1．以育127、育137、P53、P64、P

2、63等甘藍型油菜為研究材料進行小孢子培養(yǎng)，對影響小孢子胚胎發(fā)生的幾個因素進行了探討。結果表明：基因型是控制小孢子胚胎發(fā)生的關鍵，不同基因型材料之間出胚率有很大差異；固液雙層培養(yǎng)不但能夠顯著的促進小孢子的胚胎發(fā)生，而且有利于胚的生長發(fā)育；活性炭對小孢子的胚胎發(fā)生具有明顯的促進作用，特別是對難誘導出胚的材料。 2．以輪31F1、5979、18、115、627、629、P63、P64、P66等甘藍型油菜胚狀體為研究對象，分析了影響甘藍

3、型油菜小孢子胚狀體植株再生能力的幾個因素。結果表明：基因型影響著小孢子胚狀體的植株再生，同時對不同材料的出胚率和成苗率的相關性分析表明，不同材料的出胚率和成苗率是顯著正相關的；胚狀體的發(fā)育狀態(tài)直接影響著胚狀體的植株再生，發(fā)育至子葉期的胚狀體成苗率明顯高于發(fā)育處于魚雷、心型和花葉期的胚狀體；5℃的低溫環(huán)境下對胚狀體進行8～10天的預培養(yǎng)能顯著提高胚狀體植株再生；固體B5培養(yǎng)基中添加0.1g/L的6-BA能明顯的提高小孢子胚狀體的成苗率。

4、 3.恢復系材料育137、育127經過小孢子培養(yǎng)，分別成功構建了群體大小為556和195個DH株系的恢復系群體。 4.利用AFLP分子標記技術對育137DH群體進行遺傳多樣性分析，結果表明：該DH群體單株之間的遺傳變異相對較小，在實驗中AFLP擴增產物只檢測到了平均8.4％的多態(tài)性，DH群體單株之間的相似系數范圍在0.94-1.0之間，但是如果以0.98作為分類閾值，則該群體可以劃分為37個遺傳背景有差異的小群體或株系。

5、 5.對兩個DH恢復系群體進行了主要農藝性狀和品質性狀遺傳變異進行分析。結果表明：兩個DH群體主要的性狀都表現(xiàn)出一定的遺傳變異。通過對兩個群體的比較，發(fā)現(xiàn)經過小孢子培養(yǎng)獲得的兩個株系主要農藝性狀和品質性狀的變異情況較為一致，只是變異幅度上的差異。農藝性狀變異最大的是單株產量、單株角果數，其次為一次有效分枝數、分枝高度、千粒重和每角粒數，變異系數相對較小的性狀有株高、主花序長度、主花序角果數和角果長度；品質性狀變異最大的是芥酸、總硫