S100A8-A9在新生大鼠膿毒癥中的表達(dá)變化及意義.pdf

1、目的：新生兒對(duì)病原微生物高度易感，膿毒癥發(fā)病率及病死率高。固有免疫是機(jī)體抵御病原體感染的第一道防線，固有免疫細(xì)胞通過(guò)模式識(shí)別受體（PRRs）不僅能夠識(shí)別外源性病原菌相關(guān)分子模式(PAMPs)，而且能夠識(shí)別內(nèi)源性損傷相關(guān)分子模式（DAMPs），從而啟動(dòng)機(jī)體免疫應(yīng)答；S100A8／A9蛋白分子是由S100A8和S100A9構(gòu)成的異二聚體，選擇性表達(dá)于中性粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等固有免疫細(xì)胞,目前發(fā)現(xiàn)其在感染性疾病中有著復(fù)雜的生物學(xué)功能。本課題

2、通過(guò)建立新生大鼠膿毒癥模型來(lái)分析S100A8／A9在肺、肝組織中的表達(dá)以及炎癥因子TNF-ɑ、IL-6水平的變化，探討S100A8／A9在新生大鼠膿毒癥發(fā)病機(jī)制中的作用，從而為膿毒癥免疫干預(yù)提供新思路。
　　方法：采用Sprague-Dawley(SD)7日齡大鼠36只腹腔注射脂多糖（LPS）300ug/Kg建立膿毒癥模型實(shí)驗(yàn)組；同樣 Sprague-Dawley(SD)7日齡大鼠36只腹腔注射等量生理鹽水建立對(duì)照組。兩組新生大鼠

3、按照隨機(jī)原則分別于注射后2、4、8、12、24、48 h收集肺臟、肝臟并保存，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)均為6只SD大鼠。用Real-time PCR方法檢測(cè)肺臟和肝臟S100A8、S100A9、TNF-ɑ、IL-6的mRNA水平，免疫組織化學(xué)分析的方法檢測(cè)肺組織、肝組織S100A8／A9蛋白分子的表達(dá)。
　　結(jié)果：1. Real-time PCR結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，膿毒癥組新生大鼠肝組織和肺組織中S100A8、S100A9、TNF-ɑ的mR

4、NA水平均明顯升高，且變化趨勢(shì)類似。S100A8于2小時(shí)開(kāi)始增加(P<0.01)，至8小時(shí)左右達(dá)高峰，一直維持較高水平至48小時(shí)；S100A9于2小時(shí)開(kāi)始升高(P<0.01)，12于小時(shí)左右達(dá)高峰，至48小時(shí)有所下降，但仍高于對(duì)照組；TNF-ɑ于2小時(shí)開(kāi)始升高(P<0.01)，并逐步增高至12小時(shí)，48小時(shí)仍維持較高水平；2、Real-time PCR結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，膿毒癥組肺臟組織IL-6于4小時(shí)表達(dá)明顯升高(P<0.01)，

5、8小時(shí)出現(xiàn)高峰，48小時(shí)表達(dá)仍高于對(duì)照組；肝臟組織IL-6于4小時(shí)表達(dá)明顯升高(P<0.01)，12小時(shí)出現(xiàn)高峰，48小時(shí)表達(dá)仍維持較高表達(dá)水平。3、免疫組化結(jié)果顯示，在膿毒癥組肝肺組織中S100A8／A9異二聚體2小時(shí)表達(dá)明顯增多(P<0.01)，24小時(shí)左右達(dá)高峰，48小時(shí)仍維持高表達(dá)水平。
　　結(jié)論：1、新生大鼠膿毒癥發(fā)病過(guò)程中，隨著病情進(jìn)展，肺、肝組織炎癥損傷明顯加重，促炎因子TNF-ɑ、IL-6的表達(dá)增加，證明炎癥損傷是