趨化因子受體CXCR7在肝癌生長中的作用及其機制研究.pdf

1、中國是世界上肝癌第一大國，肝癌死亡率高居惡性腫瘤死亡率的第三位。肝癌具有起病隱匿、潛伏期長、惡性程度高、進展快等特點，大多數患者就診時已至中晚期。而術后居高不下的轉移復發(fā)率是肝癌治療的難點之一，也是最終導致患者死亡的重要原因。因此，闡明肝癌轉移復發(fā)的分子機制，尋求特異性早期診斷標志物，對提高肝癌患者生存率、改善生活質量均具有重要意義。
　　本課題組以遺傳背景相似而轉移潛能不同的人肝癌細胞系為模型，利用多種蛋白質組學技術和生物信息學

2、工具，篩選出一系列差異表達基因。本論文對其中一個差異表達基因CXCR7進行研究，認為CXCR7可能是一個重要的與肝癌發(fā)生及肝癌轉移密切相關的基因。論文分三部分進行論述:
　　第一部分:前言。這一章重點概述了腫瘤轉移理論，并提出惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程涉及多個趨化因子及其受體的異常表達。隨后，詳細介紹了趨化因子CXCL12及其受體CXCR4，證實腫瘤細胞可以利用趨化因子及其受體的特異性結合實現(xiàn)遠端器官的特異性轉移。近幾年研究發(fā)現(xiàn)，CX

3、CL12尚存在CXCR7這一新的受體，在不同腫瘤中的研究提示，CXCR7能直接參與調節(jié)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。此外，對本論文研究中的人肝癌細胞模型的建模過程和人肝癌研究的動物模型也進行了簡述。
　　第二部分:CXCR7在人肝癌細胞系及臨床樣本中的表達情況及慢病毒表達載體的構建。本部分選用12個不同轉移潛能的肝癌細胞系，發(fā)現(xiàn)高轉移潛能的細胞系，CXCR7表達水平高;低轉移潛能或不轉移的細胞系，CXCR7表達水平低。在10例肝癌組織的臨床樣本

4、中，肝癌灶CXCR7表達水平較癌旁顯著提高。我們還選用48例肝癌組織及肝癌轉移組織芯片，通過免疫組化方法發(fā)現(xiàn)CXCR7表達量與肝癌轉移顯著正相關。本部分還分別構建了干擾表達與過表達CXCR7的慢病毒載體pLKO.1-CXCR7shRNAs與pBabe-CXCR7，為探索CXCR7對肝癌發(fā)生發(fā)展的影響奠定基礎。
　　第三部分:CXCR7表達水平對人肝癌細胞生物學行為的影響。體外研究顯示CXCR7能增強細胞的增殖能力，穩(wěn)定干擾CXCR

5、7表達，細胞增殖能力將被顯著抑制。進一步研究發(fā)現(xiàn)，靶向干擾CXCR7表達，細胞通過G1期阻滯降低自身的增殖能力，還可能通過抑制Akt的磷酸化、下調bcl-2表達、上調PARP-1表達介導細胞凋亡的發(fā)生。在裸鼠體內，異源表達CXCR7的HepG2穩(wěn)定株能夠促進皮下瘤的生長;靶向干擾CXCR7表達的LM3細胞，裸鼠皮下種植瘤的生長速度明顯減慢，瘤體的體積與重量較對照均顯著減小。因而我們推測CXCR7在肝癌的發(fā)生過程中起著一個重要的作用。

6、r>　　本研究工作的主要貢獻在于:發(fā)現(xiàn)CXCR7是促肝癌發(fā)生的蛋白，在肝癌細胞系與肝癌組織中，CXCR7的表達水平與肝癌的發(fā)生發(fā)展顯著正相關。在體外，CXCR7能提高肝癌細胞的增殖能力。在體內，CXCR7能夠促進HepG2細胞在裸鼠體內的腫瘤生長;相應地，CXCR7shRNAs能夠抑制LM3細胞在裸鼠體內的腫瘤生長。我們將進一步通過串聯(lián)親和純化(TAP)技術與蛋白芯片手段找尋CXCR7的相互作用蛋白及其所調控的信號通路，研究其促進肝癌生