PhIP對大鼠結(jié)腸氧化損傷、原癌-抑癌基因表達(dá)的影響及沙棘油的防護(hù)作用.pdf

1、雜環(huán)胺(HCAs)是在食品和環(huán)境中廣泛存在的、高溫?zé)峤庑纬傻囊活愑袡C(jī)胺化合物。2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑[4,5-b]吡啶(PhIP)是已知20多種HCAs中的主要組成成分。研究發(fā)現(xiàn),HCAs有潛在的致突變性和致癌性,其攝取與結(jié)腸癌、乳腺癌等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。然而,對PhIP毒性及其防護(hù)作用的研究還非常有限。氧化損傷、原癌基因表達(dá)的增加、抑癌基因表達(dá)的減少,可能會導(dǎo)致細(xì)胞損傷和過度增殖,這可能是引發(fā)結(jié)腸癌的重要機(jī)制。此外,天然沙

2、棘油被證實具有抗氧化作用。故本論文通過PhIP對大鼠結(jié)腸組織氧化損傷和原癌基因、抑癌基因表達(dá)影響的研究,探討PhIP對大鼠結(jié)腸組織損傷效應(yīng)及誘發(fā)癌癥的潛在分子機(jī)制。同時,研究沙棘油對PhIP引起的氧化損傷的抑制作用。
　　本研究選取Wistar雄性大鼠作為實驗動物,通過灌胃的方法,用不同濃度PhIP進(jìn)行染毒后,采用生化分析、熒光實時定量RT-PCR、Western blot技術(shù),探究PhIP對大鼠結(jié)腸組織氧化損傷、原癌/抑癌基因m

3、RNA和蛋白表達(dá)的影響。同時,預(yù)先用不同濃度的沙棘油處理,之后通過生化分析方法測定PhIP作用后的氧化損傷指標(biāo)變化,探討沙棘油的抗氧化作用。反映脂質(zhì)過氧化損傷的指標(biāo)有超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶( CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶( GPx)及丙二醛(MDA);蛋白質(zhì)氧化損傷的指標(biāo)有蛋白質(zhì)羰基(PCO)和DNA與蛋白質(zhì)交聯(lián)率(DPC)。原癌基因選取c-fos和c-jun;抑癌基因選取p16和Rb。
　　實驗結(jié)果顯示:PhIP顯

4、著降低大鼠結(jié)腸SOD、CAT、GPx抗氧化酶活性,增加MDA含量,且存在劑量-效應(yīng)關(guān)系。與對照組相比,隨著PhIP濃度的增高(10 mg/kg和15 mg/kg的PhIP),PhIP引起的脂質(zhì)過氧化效應(yīng)有顯著差異(P<0.05);PhIP染毒導(dǎo)致DPC交聯(lián)率和PCO含量顯著或極顯著增加(P<0.05或P<0.01),并具有劑量-效應(yīng)關(guān)系。此外,PhIP顯著激活c-fos和c-jun及抑制p16和Rb的基因表達(dá)(P<0.05),呈劑量-效

5、應(yīng)關(guān)系。此外,與PhIP染毒組相比,沙棘油和PhIP的共同作用顯著提高了大鼠結(jié)腸組織的抗氧化能力,降低了MDA和PCO含量及DPC交聯(lián)率。
　　結(jié)果表明,PhIP引起大鼠結(jié)腸氧化損傷及原癌/抑癌基因表達(dá)異常變化,而PhIP和沙棘油的共同作用能抑制PhIP誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸氧化損傷而具有防護(hù)效應(yīng)。這些結(jié)果不僅為闡明PhIP對大鼠結(jié)腸毒性損傷作用提供了重要的實驗依據(jù),而且指出沙棘油具有抵抗PhIP氧化損傷效應(yīng)的能力,其對保護(hù)人群健康有積極