間充質干細胞治療缺血性心臟病療效觀察.pdf

1、背景:干細胞治療缺血性心臟病是近年來再生醫(yī)學領域研究的熱點。間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)作為一種新的細胞工程的種子細胞因為取材方便、來源充足、低免疫原性等優(yōu)點逐漸被大家接受。隨著研究的不斷深入,許多動物實驗已證實間充質干細胞移植可改善心肌缺血動物的心臟功能及存活率,然而移植后MSCs存活和轉化效率低下成為制約其臨床應用的瓶頸之一,而關于臨床人體應用后的長期安全性與有效性也仍然有爭議。這些問題的解

2、決對于指導MSCs在臨床的應用具有十分重要的意義。
　　目的:一是探索快速、簡單、有效的體外預處理提高間充質干細胞移植效率的策略。二是觀察間充質干細胞冠脈移植治療缺血性心臟病的安全性及臨床療效。
　　內容和方法:根據(jù)以上目的,本研究分成為二個部分:
　　第一部分過氧化氫預處理增強脂肪源間充質干細胞對小鼠急性心肌梗死的療效制備小鼠皮下脂肪源間充質干細胞(ADMSCs),部分體外200umol/LH2O2預處理,酶聯(lián)免疫吸

3、附法分別檢測上清液中HGF、VEGF、IL-6及TNF-α濃度。選取32只8-10周齡小鼠隨機分為假手術組、心梗(MI)組、ADMSCs組、H2O2預處理干細胞(ADMSCs-H2O2)組,結扎冠狀動脈左前降支制備心梗模型,3小時后分別經鼠尾靜脈移植PBS、ADMSCs(1 106)和ADMSCs-H2O2(1 106)。移植術后第0、7、14、28天用超聲測量各組小鼠心功能(LVEDD、LVESD、LVFS);28天心臟取材后稱重計算

4、心肌肥厚指數(shù),天狼星紅染色檢測心肌膠原含量,計算平均膠原容積分數(shù)(CVF)。
　　第二部分臍帶華通膠間充質干細胞治療缺血性心臟病臨床療效觀察選擇中國人民解放軍總醫(yī)院2010年12月至2012年3月住院的缺血性心臟病心功能不全患者32例,隨機分為治療組和對照組各16例。制備臍帶華通膠間充質干細胞,治療組行冠脈造影,經微導管向罪犯血管移植10ml干細胞懸液(細胞數(shù)2 107),對照組行冠脈造影并注射10ml0.9％氯化鈉注射液。治療前

5、、術后3月及6月分別復查心電圖與實驗室指標觀察治療安全性,復查超聲心動圖評價心功能,行SF-36健康量表評價生活質量,并記錄嚴重不良臨床事件。
　　結果:
　　1.H2O2預處理增強了ADMSCs上清液中HGF、IL-6的濃度,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。心臟超聲示ADMSCs-H2O2組較MI組及ADMSCs組LVESD與LVEDD均明顯下降(P<0.01),而FS值則顯著升高(P<0.01)。ADMSCs-H2O2

6、組心肌肥厚指數(shù)顯著降低,較MI組P<0.000,較ADMSCs組P<0.01;ADMSCs組較MI組CVF明顯降低(P<0.01),而ADMSCs-H2O2組較ADMSCs組CVF進一步下降(P<0.05)。
　　2.治療及隨訪期間兩組實驗室檢查及臨床不良事件發(fā)生率差異無統(tǒng)計學意義。治療組術后3月及6月左室舒張末容量(LVEDV)和左室收縮末容量(LVESV)均較術前顯著減小,左室射血分數(shù)(LVEF)較術前顯著提高(P<0.05)

7、;對照組各指標無明顯變化。SF-36健康量表評分治療組與對照組術后3月、6月較治療前身體功能及總體健康評分均有顯著提高(P<0.05),治療組術后6月較術后3月評分改善仍有統(tǒng)計學意義(P<0.05);組間差異比較顯示總體健康評分二組差異顯著(P<0.05)。
　　結論:
　　1、體外H2O2預處理ADMSCs增強了HGF、IL-6的分泌,移植后較未預處理ADMSCs進一步減輕了心梗后心肌纖維化,心功能改善更為明顯,顯著增強了