T細胞免疫球蛋白域黏蛋白域蛋白-3(Tim-3)啟動子區(qū)基因多態(tài)性與塵螨變應性鼻炎關系的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的與意義:變應性鼻炎(以下簡稱AR)的發(fā)病機制復雜,其發(fā)生與許多細胞因子有關,以血清中IgE、白介素4(IL-4)、IL-5水平顯著升高為特點。發(fā)作時細胞因子的產(chǎn)生及炎性介質(zhì)(mediator)的參與均與機體異常的免疫調(diào)節(jié)有關,即存在T輔助細胞亞群功能失調(diào),通過釋放細胞因子,促進IgE的合成與分泌,并增加炎性細胞的浸潤和活化。細胞因子網(wǎng)絡失調(diào)可能是變應性疾病發(fā)生的分子生物學基礎之一。T細胞免疫球蛋白域黏蛋白域蛋白(Tim)基因家族是2

2、001年發(fā)現(xiàn)的新基因家族,Tim蛋白是Tim基因編碼的一類具有共同基序的跨膜糖蛋白,Tim-1、Tim-2和Tim-3蛋白均表達在T細胞表面,其中Tim-1表達于Th2細胞,Th1細胞不表達,而Tim-3則高表達于Th1細胞而不表達于Th2細胞。國外有研究發(fā)現(xiàn)Tim-3基因多態(tài)性與變應性疾病的易感性有關[2-4]。為了解Tim-3基因多態(tài)性與塵螨變應性鼻炎的關系,本文利用聚合酶鏈式反應(PCR)及擴增阻礙突變系統(tǒng)(ARMS)技術檢測對塵

3、螨變應性鼻炎和對照組的Tim-3啟動子區(qū)基因多態(tài)性。了解漢族人群中Tim-3啟動子區(qū)基因多態(tài)性在塵螨變應性鼻炎人群中的分布情況,研究基因型與表型之間的內(nèi)在聯(lián)系,探討塵螨變應性鼻炎發(fā)生的分子遺傳學機制及遺傳因素對塵螨變應性鼻炎的作用機理,為進一步更好防治變應性鼻炎提供遺傳學線索。 材料與方法: 1.研究對象:為廣東地區(qū)廣東籍自然人群,飲食結(jié)構(gòu)相似,各研究對象之間無血緣關系。實驗組為臨床確診的AR患者88例,并根據(jù)統(tǒng)一標準進

4、行分組、分型;對照組共102例,為性別、年齡與AR組匹配的門診體檢正常人。 2.人外周血白細胞DNA的提取:靜脈血2ml,EDTA抗凝,采用美國Gentra公司的DNA抽提試劑盒,抽提基因組DNA。 3.常規(guī)空腹血樣送廣州醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院變態(tài)反應科在UniCAP100上測定TIgE含量。 4.參照基因庫(GenBank)設計引物,Tim-3基因-574G>T分型采用擴增阻礙突變系統(tǒng)(ARMS)法,Tim-3基因

5、-1541C>T,-882T>C分型用PCR-RFLP法,分別擴增Tim-3基因-1541C>T,-574G>T、-882T>C目標基因片斷,用內(nèi)切酶酶切,非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳觀察判斷相應的基因型。 5.統(tǒng)計學分析:用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行分析處理。 結(jié)果: 1.-1541C>T基因多態(tài)性與AR的關系 -1541C>T基因基因多態(tài)性與AR存在相關性,AR組中C/T基因型頻率低于對照組;AR組與對

6、照組之間等位基因頻率存在顯著性差異,AR組的C等位基因頻率顯著高于對照組。 2.-882T>C基因多態(tài)性與AR的關系 AR組與對照組對比,各基因型頻率均無顯著性差異。 AR組與對照組之間等位基因頻率不存在顯著性差異。 3.-574G>T基因多態(tài)性與AR的關系 運用x2檢驗、連續(xù)性校正等方法分析AR組與對照組的-574G>T基因多態(tài)性分布情況,結(jié)果表明-574G>T的各基因型頻率和等位基因頻率在

7、AR組和對照組之間的分布無顯著性差異。 4.Tim-3-1541C>T,-882T>C,-574G>T復合突變與AR的關系 Tim-3-1541C>T,-882T>C,-574G>T的各復合基因型在AR組和對照組之間的分布無顯著性差異。 5.TIgE與AR的關系 AR組中TIgE含量與對照組的TIgE含量有顯著性差異,AR組中TIgE含量要明顯高于對照組。 結(jié)論: 1.-1541C>T

8、基因基因多態(tài)性與AR存在相關性。AR組中C/T基因型頻率低于對照組;AR組與對照組之間等位基因頻率存在顯著性差異,AR組的C等位基因頻率顯著高于對照組,C等位基因可能是AR的易感基因。 2.-882T>C基因基因多態(tài)性與AR無明顯的相關性。AR組與對照組之間等位基因頻率不存在顯著差異。 3.-574G>T基因基因多態(tài)性與AR無明顯的相關性。AR組與對照組之間等位基因頻率不存在顯著差異。 4.-1541C>T,-8

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