染料木素抑制Aβ誘導的海馬神經元毒性的分子機制研究.pdf

1、染料木素(Genistein，Gen)是大豆異黃酮苷元(soy isoflavone aglycones)中的主要成份，廣泛存在于豆科植物中。Gen亦稱植物激素，具有較強的生理活性，它與內源性雌激素有相似的分子結構，和雌激素受體有一定的親和力，在人體內可與雌激素受體結合發(fā)揮弱雌激素樣作用和抗雌激素活性。有研究表明，Gen對神經元細胞具有明顯的保護作用，對老年性神經退行性疾病具有一定的預防和治療作用。本課題組前期動物水平研究結果表明，異黃

2、酮苷元能有效改善阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠SAMP8學習記憶能力，提高SAMP8小鼠抗氧化能力，降低SAMP8小鼠皮層AchE活力和海馬組織中的β-分泌酶活力，從而減輕Aβ過量積聚所導致的神經毒性，保護SAMP8小鼠海馬組織。Gen的保護機制可能與雌激素相似，與蛋白激酶C (Protein kinase C，PKC)通路密切相關。本論文將進一步在細胞水平就異黃酮苷元主要活性成份Gen的神經保護作

3、用的分子機制進行探討。
　　 本論文將采用原代細胞培養(yǎng)技術，以神經毒素β-淀粉樣肽(Aβ25-35)誘導大鼠原代海馬神經元細胞損傷，構建AD細胞模型，以不同濃度Gen預孵育后加入Aβ25-35共同作用，檢測海馬神經元細胞形態(tài)變化和存活率，研究Gen對大鼠海馬神經元的保護作用；并測定神經元細胞α、β-分泌酶活性及蛋白激酶C(PKC)的活性及含量的改變，以及PKC抑制劑(Myristoylated Protein Kinase C

4、Peptide Inhibitor，Myr)的影響作用，探討Gen抑制Aβ誘導的海馬神經元細胞毒性的分子機制。結果顯示，25μmol/L Aβ25-35可用于構建細胞毒性模型；Gen能顯著改善Aβ誘導的毒性細胞的形態(tài)和提高細胞存活率，0.375μg/mL的Gen產生最大的保護作用；Gen具有上調α-分泌酶活性和下調β-分泌酶活性，提高PKC的活性和PKCα表達的作用，Gen的激活作用可被PKC抑制劑Myr部分阻斷。結果表明，Gen對Aβ