巢式SCCA RT-PCR檢測食管癌外周血微轉移及其臨床意義.pdf

1、鄭州大學碩士學位論文巢式SCCARTPCR檢測食管癌外周血微轉移及其臨床意義姓名：郭濤申請學位級別：碩士專業(yè)：內科學指導教師：王立東20060415郟卅l大學2t1()t；俑碩1學似嗆文巢止州c^mlqR檢測食管癌外川l仇微轉移及J‘臨床意義癌抗原(squamouscellcareinomaant遠en，sccA)過度表達參與上皮源性惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉移，盡管作為癌微轉移標志物的特異性尚存在不一致的報道，SCCA參與癌微轉移的研究

2、已有較多報道。通過巢式逆轉錄聚合酶鏈式反應fnestedR1二Pc鼬擴增腫瘤細胞特異性或組織特異性基因，能高度靈敏地從1X106一lxl0。7個細胞中檢測出一個腫瘤細胞，是目前檢測腫瘤隱匿微轉移的最有效方法之一。本實驗旨在利用巢式逆轉錄聚合酶鏈式反應探討sccAmRNA作為診斷食管癌外周血微轉移的可行性及其臨床意義。材料與方法1病例選擇食管癌患者：30例手術治療食管癌患者均來自食管癌高發(fā)區(qū)林州市中心醫(yī)院(2004—2005年)，其中男性

3、18例(平均年齡599歲；年齡范圍在4373歲)，女性12例(平均年齡616歲；年齡范圍在53—70歲)，患者術前均未接受任何放療或化療。所有患者術后均進行跟蹤隨訪，隨訪時間均在37周以上。術后73周內死亡的5例患者死因均為腫瘤復發(fā)或轉移。正常對照組：20例健康受檢對象來自河南省林州地區(qū)食管癌普查人群。其中女性17例(平均年齡356歲；年齡范圍在2743歲)，男性3例(平均年齡335歲；年齡范圍在2849歲)。2外周血和手術切除標本的采

4、集和處理30例食管癌患者均分別采集2次空腹外周靜脈血(每人每次5m1)(手術前3天和手術后10天)并收集每例食管癌手術切除標本。20例健康受檢對象均采集5ml空腹外周靜脈血。所有血樣均現(xiàn)場分離有核細胞并液氮保存，再轉入實驗室80℃冰箱備用。手術切除標本按本室常規(guī)處理(一半固定，一半80℃保存)，固定組織進行常規(guī)組織學處理，并進行病理學診斷和TNM分期(1987)。冰凍組織進行冰凍切片，HE染色以備RNA提取。3sccAl免疫組化檢測采用