甘蔗莖尖組織培養(yǎng)過程中褐變與生理生化性狀的關系.pdf

1、甘蔗系無性繁殖作物，多年連作后受到病害的侵染逐漸累積，使得產量減少。生產上主要用于控制病害的方法很多，其中利用莖尖組織培養(yǎng)出來得到的甘蔗健康種苗是控制病害最有效的方法之一。由于組織培養(yǎng)具有繁殖快，節(jié)省苗種以及能夠生產脫毒苗等優(yōu)點，使得組織培養(yǎng)技術在甘蔗品種的快速繁殖和良種推廣上得到廣泛應用。在生產上，外植體的褐變是造成甘蔗組織培養(yǎng)失敗的主要原因。
　　本試驗分析了甘蔗品種新臺糖22號(ROC22)不同節(jié)位芽在不同的催芽時間的褐變率

2、及其外植體的多酚、多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶(POD)的變化，用HPLC法測定組織培養(yǎng)過程中褐變材料和正常生長材料體內沒食子酸、兒茶素、綠原酸、表兒茶素之間的變化，還觀察了甘蔗莖尖組織培養(yǎng)過程褐變材料和正常生長的材料的超微和顯微結構，以探討褐變與生理生化性狀的關系。主要試驗結果如下:
　　1.不同催芽時間不同節(jié)位ROC22外植體的多酚含量和PPO、POD之間都有不同程度的變化。多酚的含量隨著催芽時間的變化由高變低再變高。PP

3、O活性也有個降和升的過程。POD活性的變化就比較復雜，但2位與3位芽和5位與6位芽變化趨勢一致。1位芽的多酚含量不論在什么時候都比其他位置芽的低，而POD活性剛好相反，不論催芽多少天，1位芽的POD含量都比其他位置芽的高。顯著性分析表明，褐變率和PPO和POD活性有著顯著的正相關，而與多酚含量不存在顯著性關系，多酚與POD活性之間存在顯著的負相關。
　　2.不同培養(yǎng)時期不同生長狀態(tài)的甘蔗莖尖材料的超微和顯微結構觀察表明，能夠正常生

4、長的莖尖細胞，其內部各細胞器保持著基本形態(tài)結構。在顯微結構下觀察，不論是正常生長的細胞還是褐變的組織，它的莖尖都在發(fā)育，但是在發(fā)育的過程中褐變的發(fā)育較為緩慢。在超微結構下觀察，正常生長的細胞體內各細胞器的功能良好，進行著正常的生長分化，褐變材料的細胞器發(fā)生不同程度的變化，如液泡由其液泡膜邊界開始變得模糊，由外往里消解線粒體的結構變形破裂，細胞核和核仁變形或者降解，細胞壁的膨脹斷裂最終細胞死亡。
　　3.不同培養(yǎng)時期正常生長和褐變的