荔枝核總黃酮對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞增殖的抑制作用及對(duì)蛋白TGF-β1和α-SMA表達(dá)的影響.pdf

1、目的:研究荔枝核總黃酮(litchi flavonoids TFL)對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及其可能的作用機(jī)制。
　　方法:應(yīng)用藥物 TFL對(duì)生長(zhǎng)狀態(tài)穩(wěn)定的大鼠肝星狀細(xì)胞株(HSC-T6)進(jìn)行處理(20mg/ml、40 mg/ml、80 mg/ml、160 mg/ml4個(gè)濃度,并設(shè)置空白對(duì)照組),MTT法檢測(cè)TFL對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖的抑制活性,并根據(jù)抑制率計(jì)算樣品對(duì)細(xì)胞增殖的半數(shù)抑制質(zhì)量濃度(IC50);

2、吖啶橙染色觀察細(xì)胞凋亡;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)經(jīng)不同濃度TFL處理后HSC-T6細(xì)胞周期的變化情況。Western Blot檢測(cè)經(jīng)不同濃度TFL處理后HSC-T6細(xì)胞中TGF-β1(transforming growth factor-β1)和а-SMA(α-smooth muscle actin)蛋白表達(dá)水平的改變。
　　結(jié)果:MTT檢測(cè)結(jié)果顯示,TFL對(duì)HSC-T6具有增殖抑制活性(P<0.05),其半數(shù)抑制濃度(IC50)為101.

3、98mg/ml。吖啶橙染色顯示,藥物組細(xì)胞中出現(xiàn)核濃縮、核碎裂及致密濃染亮綠色凋亡小體。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,對(duì)照組細(xì)胞 Gl期細(xì)胞比例為47.68±2.92％, G2期為19.58±2.93%,S期為32.75±2.09%;TFL藥物處理組細(xì)胞G1期細(xì)胞數(shù)量增加,而G2期細(xì)胞顯著減少,與對(duì)照組比較,P<0.05。Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示,細(xì)胞中TGF-β1和а-SMA蛋白表達(dá),隨藥物濃度增加,其表達(dá)呈下降趨勢(shì),與對(duì)照組相